成果名称：生猪 “321”免疫新技术试验研究及推广应用
完成单位：保山市动物疫病预防控制中心、施甸县动物疫病预防控制中心，昌宁县动物疫病预防控制中心
完成人：濮永华、龚兴建、周开艳、钏有科、匡继才、黄 杰、赵 君、李玉静、万 奇
摘 要：为创新免疫方式、提升重大动物疫病防控能力，云南省动物疫病预防控制中心研究提出猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病“三苗同步、两点注射、一次完成”免疫方式 （简称321免疫），使生猪免疫技术不断创新。在技术创新过程中，保山市动物疫病预防控制中心承担省级安排的试验任务，在组织完成省级安排的口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病三苗同步免疫试验、攻毒试验任务的基础上，在全省率先推广生猪 “321”免疫新技术，全市推广面达100％，取得生猪免疫工作效率提高、免疫密度提高、免疫抗体合格率提高，免疫反应率下降、反应死亡率下降、疫病死亡率下降，确保不发生区域性重大动物疫情、确保不发生畜产品安全事件“三个提高、三个下降、两个确保”的显著成效。经济、社会、生态效益显著，有效预防控制生猪重大疫病发生和流行，为生猪产业持续健康发展、畜产品质量安全、社会公共卫生安全提供了保障。对有效增加农民收入、维护社会和谐稳定做出了贡献。
主题词：生猪；免疫技术；试验研究；推广应用；成果
1 立项背景
保山市位于云南省西部，腾冲、龙陵与缅甸接壤，国境线长167.78千米，口岸众多，特殊的地理位置，使保山市动物疫病防控任务艰巨。随着畜牧业的快速发展，动物疫病也在快速发展。近几年国际国内动物疫情形势异常复杂。在饲养的家畜家禽中，尤以猪的疫病最为复杂，老的疫病如猪瘟、猪肺疫、猪丹毒、仔猪副伤寒尚未消灭，新的疫病却不断增加，如高致病性猪蓝耳病、缅甸98谱系口蹄疫、伪狂犬、传染性胸膜肺炎、圆环病毒、细小病毒病、附红细胞体、仔猪流行性腹泻等，我们每天都要吃它的肉的猪，其实是“百病缠身”。
2007年6月，保山市施甸、隆阳、龙陵、昌宁、腾冲部分乡镇相继发生高致病性猪蓝耳病疫情，全市共有41个乡镇、293个村委会、26929户农户的猪发病，发病猪117723头，发病死亡35234头，扑杀病猪36197头，疫情造成直接经济损失6000多万元。2009年一些地方又发生猪O型口蹄疫，损失也十分惨重，有一个猪场发生疫情后，自行封闭2个多月，150多头母猪无法配种，损失70万～80万元。2011年初零星散发猪口蹄疫疫情，某县有一个猪场坚持不免口蹄疫导致疫情发生，该场存栏267头猪，仔猪死亡84头，损失20万～30万元。2011年6月，昌宁县又发生高致病性猪蓝耳病疫情，有5个乡镇35个村332个村民小组2558户养殖户饲养的8334头生猪发病，死亡1767头，损失近200万元。痛定思痛，政府、养猪大户、散养户都开始重视免疫工作，多数县区、乡镇都增加投入，按照省市要求推行 “分片包干、集中免疫、整村推进”加强基础免疫工作。
猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病3种疫病是危害养猪业的主要传染病，2007年国家将这3种疫病纳入强制免疫病种，基层开展强制免疫时1头猪要分3次免疫3种疫苗，劳动强度大，工作效率低，抵触情绪大，致使各病种免疫达不到国家要求的群体免疫密度90％以上、免疫合格率70％以上的目标，疫情时有发生，给养猪业带来巨大的损失。散养户生猪免疫一直没有很好的免疫方式，要将国家要求猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病100％的实施免疫，基层迫切需要有一种好的免疫方式。云南省农业厅兽医处、云南省动物疫病预防控制中心非常重视免疫方式和免疫技术创新，只有创新免疫方式，才能构建坚实的免疫保护屏障，有效预防控制生猪重大疫病发生流行，为生猪产业健康发展和畜产品安全、社会公共卫生安全提供保障。切实解决基层生猪3种疫苗免疫方式的燃眉之急，研究推广猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病三苗同步免疫技术势在必行。
2 详细科学技术内容
2.1 试验任务和免疫任务来源
试验任务为云南省农业厅兽医处、云南省动物疫病预防控制中心安排保山市动物疫病预防控制中心承担完成；生猪免疫任务来源于云南省农业厅、云南省动物疫病预防控制中心下达的年度免疫方案和免疫任务文件：云农牧 ［2012］10号、［2013］11号、［2014］ 16号，云疫控 ［2012］1号、［2013］4号、［2014］1号。
2.2 “321”免疫试验及攻毒试验
2.2.1 试验情况
为验证云南省动物疫病预防控制中心在 “331”免疫试验获得成功的基础上，提出并在昆明市西山区小试成功的猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病三苗同步、两点注射、一次完成 （321）免疫效果和推广应用可行性。2011年1～12月，由云南省动物疫病预防控制中心牵头，组织保山市动物疫病预防控制中心、中牧股份保山生物药厂、施甸县动物疫病预防控制中心联合开展猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病 “三苗同步、两点注射、一次完成”的 “321”免疫效果抗体检测及攻毒试验。试验用阴性猪筛选在施甸县酒房乡垭口村进行，免疫注射试验和攻毒试验在中牧股份保山生物药厂安效检车间进行，免疫抗体检测在云南省动物疫病预防控制中心实验室进行。试验用疫苗由云南省动物疫病预防控制中心从政府采购疫苗中提供。试验期间累计筛选无口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病、圆环病毒病的阴性猪303头，分批购进270头，分猪口蹄疫合成肽、猪瘟脾淋苗、高致病性猪蓝耳病活疫苗三苗组，猪口蹄疫灭活苗、猪瘟脾淋苗、高致病性猪蓝耳病活疫苗三苗组，猪口蹄疫合成肽、猪口蹄疫灭活苗、猪瘟脾淋苗、高致病性猪蓝耳病活疫苗单苗组、空白组，共7个组。7个组共进行了3期免疫试验、2期攻毒试验。单苗组于试验猪颈部一侧注射；三苗组于试验猪颈部一侧注射口蹄疫合成肽或灭活疫苗，另一侧注射猪瘟和高致病性猪蓝耳病活疫苗混合疫苗，剂量均为1.2头份。免疫抗体检测分别在免疫后15天、30天、45天、60天进行 （持续观察组采血至120天），攻毒均在免疫后60天按三苗组、单苗组、空白组各组单独进行，攻毒剂量、观察时间均按国家标准进行，标准毒使用前分别进行活体复壮。
2.2.2 试验结果
（1）免疫反应观察结果：3期免疫试验，各试验组试验猪在免疫后24小时内均未出现精神沉郁、食欲减退、呕吐、腹泻和死亡等免疫应激反应情况。
（2）免疫抗体检测结果：口蹄疫、猪瘟脾淋苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗同步两点免疫中，未发现3种疫苗同步免疫相互间存在干扰作用，猪瘟免疫后15天即可达到国家要求，口蹄疫合成肽疫苗、高致病性猪蓝耳病活疫苗于免疫后30天即可达到国家要求，口蹄疫灭活疫苗于免疫后45天达到国家要求。
（3）攻毒试验结果：经2期攻毒试验，猪瘟各组保护率90％、蓝耳病各组保护率100％、口蹄疫各组保护率80％～100％，各期各空白组保护率均为0。
2.2.3 试验小结
猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病 “三苗同步、两点注射、一次完成”（321）免疫试验、攻毒试验结果显示：该项技术免疫反应小、抗体合格率高、攻毒保护率高，在基层推广具有较高的安全性、有效性、可行性，可提高免疫密度、免疫效果、免疫工作效率，降低疫苗反应率、反应死亡率、疫病死亡率。试验研究结果为全省、全市推广生猪“321”免疫新技术提供了科学依据。
2.3 生猪 “321”免疫推广成效
2012年、2013年、2014年，全市5个县区、72个乡镇、881个行政村，生猪“321”免疫新技术推广面达100％，其中2012年推广345万头，2013年推广350万头，2014年推广350万头，取得 “三个提高、三个下降、两个确保”的成效。
三个提高：一是免疫工作效率提高。推广 “321”免疫新技术，把散养户生猪两阶段免疫变为一次性免疫，生猪免疫时间节约1半，全市每季集中免疫时间由原来的45天，缩短至现在的1个月左右，免疫工作效率提高1倍以上。二是免疫密度提高。推广“321”免疫新技术，3种疫苗一次完成注射，带动了猪蓝耳病、猪口蹄疫的免疫。将原来免疫猪蓝耳病、猪口蹄疫不积极的地方的猪蓝耳病免疫密度由60％提高到90％以上，猪口蹄疫免疫密度由50％提高到90％以上。三是免疫抗体合格率提高。猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病免疫抗体转阳率：2012年分别为72.24％、83.75％、79.89％，2013年分别为73.26％、89.72％、86.82％，2014年分别为73.36％、89.92％、86.32％，较推广之前明显提高。
三个下降：一是免疫反应率下降。2012年、2013年、2014年，生猪强制免疫反应率分别为0.56％、0.46％、0.44％，与2011年的0.675％相比分别下降17.03％、31.85％、34.81％。二是免疫反应死亡率下降。2012年、2013年、2014年，生猪强制免疫反应死亡率分别为0.057％、0.047％、0.045％，与2011年的0.067％相比分别下降14.93％、29.85％、32.84％。三是生猪疫病死亡率下降。2012年、2013年、2014年，生猪疫病死亡率分别为1.81％、1.41％、1.45％，与2011年的2.21％相比分别下降18.1％、36.2％、34.39％。
两个确保：推广 “321”免疫新技术，免疫密度和质量提高，有效预防控制猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病的发生流行，达到 “两个确保”目标。2012～2014年，由于防疫工作扎实，全市生猪疫情平稳，生猪零星散发疫情显著减少，确保不发生区域性重大动物疫情和确保不发生重大畜产品安全事件，筑牢免疫屏障为实现 “两个确保”目标提供了保障。
推广应用前景：三年推广实践证明，该技术提高了生猪免疫工作效率、免疫密度、免疫质量，降低了免疫反应率、反应死亡率、疫病死亡率。为生猪生产筑牢了免疫屏障，有效预防控制生猪疫情，保障生猪产业持续健康发展，经济、社会生态效益显著，推广前景十分广阔。
2.4 生猪 “321”免疫推广措施
一是认真制定免疫方案。根据2012年、2013年、2014年 《云南省重大动物疫病强制免疫方案》，制定下发2012年、2013年、2014年 《保山市重大动物疫病强制免疫方案》，在全市大力推广散养户生猪 “321”免疫新技术。统一免疫方案，做到全市一盘棋，为推广新技术明确了方向。
二是加强技术交流和培训。为配合省级推广 “321”免疫新技术，将试验推广情况制成ppt，分别于2012年4月、9月、11月的州市中心主任会、州市动物防疫研讨会、州市县区疫控机构防疫技术培训会上进行交流，3次交流参会人员达313人。为在全省推广生猪 “321”免疫新技术做出一定贡献。为在全市迅速推广 “321”免疫新技术，2012年撰写 《一猪三针操作要点和注意事项》、2013年撰写 《生猪 “321”免疫技术及注意事项》、编写 《保山市畜禽免疫技术手册》，印发市、县、乡、村相关防疫人员参照执行。2012～2014年，举办市级专家授课培训生猪 “321”免疫新技术的培训班20期，培训市、县、乡、村各级防疫人员1436人。各县区在每年的春秋防疫会上对乡镇、村级防疫员同时进行了培训。加强培训，为推广新技术奠定了基础。
三是强化 “整村推进”免疫模式。保山市政府下发 《保山市动物防疫整村推进实施方案》，从组织领导、经费投入、强制免疫、队伍建设等方面加强了对 “动物防疫整村推进”工作的措施和制度保障，以乡镇防疫队、小分队或村发动社协助形式开展免疫工作。全市72个乡镇整村推进开展面达100％，881个行政村整村推进推广面达85％。
四是加强动物防疫宣传。市、县、乡召开防疫工作会议、开展免疫注射、检查防疫工作，请电视台、报社记者进行宣传报道。保山市动物疫病预防控制中心统一提炼了 《保山市动物防疫宣传提纲》，各县区按照保山市畜牧兽医局的要求，加强防疫宣传，为新技术推广营造了良好的防疫宣传舆论氛围。仅2013年统计，全市在市县电视台播出防疫新闻16条，在保山市广播电台播出防疫专题2期，在 《保山日报》、保山市 《畜牧简报》刊登防疫新闻、信息30条，县区设立永久性防疫宣传牌92块，村级墙壁防疫标语124条，发放 《保山市畜禽免疫技术手册》1600册、防疫宣传资料30000份。
五是加强防疫工作痕迹管理。市、县、乡疫控机构建立全省统一的疫苗进出台账，记录每批疫苗的生产厂家、生产批号、出入库数量等；在规模养殖场、养殖小区、养殖大户建立 《规模养殖免疫档案》；在村民小组建立 《散养户免疫档案》，同时在饲养户建立《免疫户口册》。以纸质档案为基础在乡镇兽医站建立全市统一、到村到户、有自动汇总功能的免疫档案电子文档。截至2014年年底，全市共订购发放 《云南省规模养殖免疫档案》2842册、《云南省散养户免疫档案》29325册、《云南省免疫户口册》462185册。全市纸质免疫档案和电子免疫档案建立使用率达100％， 《云南省免疫户口册》覆盖率达80％。
六是加强督查、狠抓落实。为确保防疫工作有效落实，市级由局领导带队，抽调相关科室和二级单位业务骨干，组成5个督查组分别深入5个县区开展防疫工作督查。每季防疫期间督导组分别下县区督促检查了1～2次。各县区相应成立防疫督查组，对乡村防疫工作进行督查。通过督导组 “分片包干”督促、检查、指导，全市形成了层层抓落实的工作局面。
3 与当前省内外同类研究、同类技术综合对比
该项试验研究为云南省动物疫病预防控制中心在创新生猪免疫方式中提出并组织试验研究及推广。保山市动物疫病预防控制中心承担免疫试验和攻毒试验获得成功，并在全省率先推广取得显著成效。生猪3种疫苗两点同步免疫技术 （简称321免疫新技术），经云南省动物疫病预防控制中心委托云南省科学技术情报研究院查新，生猪3种疫苗两点同步免疫技术，研究与推广国内仅见云南省的相关研究人员及各州市的推广应用的报道。该项技术具有以下特点：
（1）通过免疫试验、攻毒试验、扩大免疫等科学试验，较为全面地对口蹄疫 （合成肽疫苗、灭活疫苗）、猪瘟脾林活疫苗、高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫技术进行了试验研究，证明其科学性和可行性。
（2）该研究突破了口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病分3次单独免疫的传统免疫方式，建立了口蹄疫、猪瘟脾林活疫苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫的新方法，列入云南省重大动物疫病强制免疫方案和云南省中长期动物疫病防治规划。
（3）将猪瘟脾林活疫苗、高致病性猪蓝耳病活疫苗用同一种稀释液进行稀释成一个混合疫苗，用于口蹄疫、猪瘟脾林活疫苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫技术。
（4）免疫试验、攻毒试验证明口蹄疫、猪瘟脾林活疫苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫无免疫干扰现象，并可同步产生免疫抗体，缩短了免疫时间，降低了免疫成本，提高了抗疫病发生风险的能力，实用性和可操作性强，经济效益、社会效益和生态效益显著，破解了基层防疫工作的难题。
（5）通过试验研究将口蹄疫、猪瘟脾林活疫苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫技术大面积应用于临床免疫，且免疫效果理想，达到国家要求，免疫应激反应小，应激反应死亡数量少。
综合以上特点分析，以及保山市承担免疫试验和攻毒试验获得成功，在省内率先推广试验研究成果，大力推广生猪 “321”免疫新技术，推广面达100％，取得 “三个提高、三个下降、两个确保”的显著成效。在全省同类试验研究推广应用中处于领先地位。
4 技术发明点及创新点
（1）首次通过免疫试验、攻毒试验、扩大免疫等科学试验，较为全面地对口蹄疫（合成肽疫苗、灭活疫苗）、猪瘟脾林活疫苗、高高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫技术进行了试验研究，证明其科学性和可行性。
（2）首次突破了口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病分3次单独免疫的传统免疫方式，建立了口蹄疫、猪瘟脾林活疫苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫的新方法，列入云南省重大动物疫病强制免疫方案和云南省中长期动物疫病防治规划。
（3）首次将猪瘟脾林活疫苗、高致病性猪蓝耳病活疫苗用同一种稀释液进行稀释成一个混合疫苗，用于口蹄疫、猪瘟脾林活疫苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫技术。
（4）首次以免疫试验、攻毒试验证明口蹄疫、猪瘟脾林活疫苗和高致病性猪蓝耳病活疫苗3种疫苗两点同步免疫无免疫干扰现象，并可同步产生免疫抗体，缩短了免疫时间，降低了免疫成本，提高了抗疫病发生风险的能力，实用性和可操作性强，经济效益、社会效益和生态效益显著，破解了基层防疫工作的难题。
（5）首次在省内率先推广试验研究成果，大力推广生猪 “321”免疫新技术，推广面达100％，取得 “三个提高、三个下降、两个确保”的显著成效。
5 综合效益
5.1 经济效益
（1）降低反应死亡率产生的经济效益：2012年、2013年、2014年，免疫反应死亡率分别为0.057％、0.047％、0.045％，较2011年的0.067％，反应死亡率分别下降0.01个、0.02个、0.022个百分点，按注射数分别少死猪345头、700头、770头，少死1头生猪按1000元计算，每年少死亡生猪减少损失分别为34.5万元、70万元、77万元，共181.5万元。
（2）疫病死亡率下降产生的经济效益：2012年、2013年、2014年，生猪疫病死亡率分别为1.81％、1.41％、1.45％，较2011年2.21％，下降0.4个、0.8个、0.76个百分点，按2012年免疫生猪345万头、2013年免疫生猪350万头、2014年免疫生猪350万头计算，年内少死猪分别为13800头、28000头、26600头，少死的每头生猪按1000元计算，每年疫病死亡率下降少死生猪减少损失分别为1380万元、2800万元、2660万元，共计6840万元。
（3）降低村防疫员劳动成本产生的经济效益：3种疫苗由3次3针变为1次2针完成，疫苗注射费由每头猪3次、每次1.5元，变为每头1次、每次2元，可节约注射手续费2.5元／头，每年节约注射费用分别为862.5万元、875万元、875万元，共计2612.5万元。
（4）提高疫苗利用率产生的经济效益：2011年70％，2012年86.25％ （提高16.25个百分点），2013年87.5％ （提高17.5个百分点），2014年87.5％ （提高17.5个百分点）。每年减少疫苗浪费235万元、250万元、250万元，共计735万元。
上述4项共计产生经济效益10369.0万元。
5.2 社会效益
通过 “321”免疫新技术的推广应用，生猪的免疫密度、免疫抗体合格率提高，筑牢免疫屏障，确保不发生区域性重大动物疫情，产生显著的社会效益：根据近年来重大动物疫情1.5年一个周期的发病规律，以及开展重大动物疫病疫情监测风险分析结果，2012～2014年，推广生猪 “321”免疫新技术，提高生猪免疫密度和质量，筑牢免疫屏障，至少防止区域性生猪疫情1.5起，按照2007年发生高致病性猪蓝耳病疫情，发病死亡35234头、扑杀病猪36197头共71431头，每头损失按1000元计算，可避免损失71431头×1000元＝7143.1万元，相当于2012～2014年产生社会效益10714.65万元，而且保障了生猪产业安全，为全市实现生猪产值目标起到保驾护航的作用。
5.3 生态效益
推广生猪 “321”免疫新技术，有效预防控制生猪重大疫病，可从根本上遏制生猪疫情的发生，减少生猪饲养过程中病原微生物对土壤和水体的污染，对保护生态环境具有重要的意义；动物疫病是危害畜牧业、畜产品安全和公共卫生安全的主要因素，推广生猪“321”免疫新技术，预防控制生猪重大疫病发生和流行，对保障生猪产业持续健康发展和畜产品质量安全，维护社会公共卫生安全都具有十分重要的意义。由此可见，大力推广生猪 “321”免疫新技术，不但保障生猪产业健康发展，产生了显著的经济、社会效益，对农民增收做出了巨大贡献，而且对保护生态环境、维护公共卫生安全、维护社会稳定、促进经济社会和谐发展都做出了重大的贡献。
附件目录：
1.“生猪321免疫新技术试验研究及推广应用”科技项目评定证书。
2.科学技术成果证书和科技成果登记表。
3.任务文件
（1）云南省动物疫控中心：《猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病三种疫苗同步分点注射免疫效果试验研究方案》。
（2）云南省农业厅：2012年、2013年、2014年重大动物疫病强制免疫方案。
（3）云南省动物疫病预防控制中心：2012年、2013年、2014年度动物防疫任务文件。
（4）保山市畜牧兽医局：保山市2012年、2013年、2014年重大动物疫病强制免疫方案。
（5）保山市政府办公室：《保山市动物防疫整村推进实施方案》。
4.《生猪 “321”免疫新技术试验研究及推广应用工作总结报告》。
5.《生猪 “321”免疫新技术试验研究及推广应用技术总结报告》。
6.《生猪 “321”免疫新技术试验研究及推广应用效益分析报告》。
7.《应用证明》（6份）。
8.“生猪三苗两点免疫新技术”科技查新报告——云南省科学技术情报研究院
9.其他
（1）《生猪 “321”免疫技术及注意事项》。
（2）《生猪 “321”免疫新技术推广应用及成效分析》。
（3）图片资料：生猪 “321”免疫新技术试验研究及推广应用图片选编。
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