玻璃器皿的干燥和灭菌

三、玻璃器皿的干燥和灭菌

(一)玻璃器皿的清洗

一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤。清洗后的玻璃器皿不仅要求干净透明无油迹，而且不能残留任何物质。

(1)浸泡:初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附着物软化或被溶解掉。新的初次使用的玻璃器皿，在生产及运输过程中，玻璃表面带有大量的灰尘，且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等。新瓶使用前应先用自来水简单刷洗，然后用稀盐酸液浸泡过夜，以中和其中的碱性物质。再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的蛋白质，干涸后不易洗掉，故用后要立即浸入水中，且要求完全浸入，不能留有气泡或浮在液面上。

(2)刷洗:浸泡后的玻璃器皿一般要用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附着较牢的杂质。刷洗要适度，过度会损害器皿表面光泽度。

(3)浸酸:清洁液是由重铬酸钾、浓硫酸和蒸馏水按一定比例配制而成，其处理过程称为浸酸。清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用，而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质。清洁液去污能力很强，是清洗过程中关键的一环。浸泡时器皿要充满清洁液，勿留气泡或使器皿露出清洁液面。浸泡时间一般需过夜，不应少于6h。

清洁液配制时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，并要保护好面部及身体裸露部分。配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸，并不停地用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制溶液应选择塑料制品。配成后清洁液一般为棕红色。

(4)冲洗:玻璃器皿在使用后，刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗，使之尽量不留污染或清洁液的残迹。冲洗最好用洗涤装置，既省力效果又好。如用手工操作，则需流水冲洗10次以上，最好用蒸馏水清洗3～5次，晾干备用。

(二)灭菌

因高温能使微生物蛋白质变性，所以高温处理能达到灭菌的目的。高温灭菌的方法有干热灭菌法和湿热高压灭菌法两种。

1．干热灭菌法

将器皿及用具置160℃干燥箱2h，即可利用热空气杀死所有微生物及芽孢。在干热灭菌过程中要注意:

(1)烘箱内忌放易燃、易挥发物品，物品不能装得太满，棉塞等物品不能接触烘箱壁，以免发生燃烧事故。

(2)烘箱温度达100℃以上后，切忌打开烘箱玻璃门，否则新鲜空气进入会引起燃烧，或因剧烈的冷热变化而使玻璃器皿炸裂。

2．湿热高压灭菌法

此法高温与高压结合，蒸汽传热均匀，灭菌时间短，效果好。常用各种高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。一般当温度达121℃～125℃时，保持20～40min即可达到满意的效果。用此法灭菌应注意:

(1)灭菌锅内水量要适当，过少会烧干而发生事故，过多会导致消毒物品被水浸湿。

(2)灭菌开始时打开放气阀，加热使蒸汽将锅内的冷气排出，然后再关上放气阀继续加热，否则灭菌效果不好。

(3)灭菌加热时要随时注意压力变化，如压力指针超过红色警戒线而安全阀仍未放气，则可能是安全阀失灵，应立即停止加热，以防爆炸。

(4)溶液或培养基灭菌后不能立即放气，以免器皿炸裂或溶液喷出，需待其自然冷却，压力降至零时才可打开放气阀，揭开锅盖。