五、酶的专一性
(一)实验原理
酶的催化作用具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的催化作用为例,来说明酶的专一性。
淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉的水解。用班氏(Benedict)试剂检查糖的还原性。
(二)实验药品、实验设备
1.2%蔗糖溶液;
2.溶于0.3%氯化钠的1%淀粉溶液(现用现配);
3.稀释200倍的新鲜唾液;
4.蔗糖酶溶液:将鲜酵母用水洗涤2~3次(离心法),然后放在滤纸上自然干燥。取干酵母100g,置于乳钵内,加适量蒸馏水及少量细沙,用力研磨,提取约1h,再加蒸馏水使总体积约为原体积的10倍。离心,将上清液保存于冰箱中备用。
5.班氏(Benedict)试剂:无水硫酸铜1.74g溶于100mL热水中,冷却后稀释至150mL。取柠檬酸钠173g,无水碳酸钠100g和蒸馏水600mL,加热,溶解后冷却并加水至850mL,再加入冷却的150mL硫酸铜溶液。本试剂可长久保存。
6.恒温水浴,沸水浴,试管及试管架。
(三)实验方法
1.淀粉酶的专一性
分别在6支试管中,按表3-4所示顺序和剂量加入试剂,观察各试管发生的现象,并解释实验结果(提示:唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶)。
表3-4 淀粉酶的专一性实验
2.蔗糖酶的专一性
分别在6支试管中,按表3-5所示顺序和剂量加入试剂,观察各试管发生的现象,并解释实验结果。
表3-5 蔗糖酶的专一性
(四)实验记录
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