【摘要】：先用肉眼观察玻璃外面的幼叶，至0.5cm大小时，再移至解剖镜下，用手或镊子夹住茎部，用解剖针轻轻剥掉幼叶和叶原基，解剖针可蘸少许酒精，过火灭菌，但要注意解剖针的冷却，当剥到看见一个闪亮半圆球的顶端分生组织点，外缘只剩两枚幼叶原基时，可用刀将微茎尖切下来，然后接到培养基中，注意随切随接，防止变干变褐，培养基选用MS+BA2+NAA0.2，每瓶接入1～2枚微茎尖，共接5瓶。
微茎尖脱毒培养_组培快繁生产技术
实验九 微茎尖脱毒培养
一、目的、要求
熟练掌握微茎尖培养的各个技术环节，包括外植体选择、灭菌、接种、培养观察与对策等。
二、实训时间
春或早秋两季。
三、材料、仪器和试剂
材料：菊花茎尖或香石竹茎尖。
仪器：超净工作台、灭菌锅、显微镜、剪刀、长镊子、烧杯（500ml）、培养皿、移液管。
试剂：BA、NAA、0.1%次氯酸钠溶液。
四、方法步骤
（一）外植体选取、灭菌、剥离和接种
对选取的茎段可简单灭菌，如用酒精棉球擦拭，但为谨慎起见，也可进行表面灭菌，如用0.1%次氯酸钠表面消毒10分钟。在超净工作台下，将茎尖切成1.5cm长，下端约1cm长留作手拿部分。先用肉眼观察玻璃外面的幼叶，至0.5cm大小时，再移至解剖镜下，用手或镊子夹住茎部，用解剖针轻轻剥掉幼叶和叶原基，解剖针可蘸少许酒精，过火灭菌，但要注意解剖针的冷却，当剥到看见一个闪亮半圆球的顶端分生组织点，外缘只剩两枚幼叶原基时，可用刀将微茎尖切下来，然后接到培养基中，注意随切随接，防止变干变褐，培养基选用MS+BA2+NAA0.2，每瓶接入1～2枚微茎尖，共接5瓶。
（二）培养观察
微茎尖培养须经历漫长的时间，一般需要持续2个月以上才能见到微茎尖的分化，一般由茎尖直接分化出芽丛。
五、实训思考
1.微茎尖剥离时会出现什么问题？怎么解决？
2.微茎尖培养时会有什么变化？
六、实训报告
将本次实训结果整理成实训报告。
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