显微镜的使用与维护

任务3　显微镜的使用与维护

1．显微镜的使用1）观察前的准备

图2－12　光学显微镜构造

1—物镜转换器；2—物镜；3—压片夹；4—载物台；5—聚光器；6—虹彩光圈；7—光源；8—镜座；9—电源开关；10—光源滑动变阻器；11—粗准焦螺旋；12—细准焦螺旋；13—镜臂；14—镜筒；15—目镜；16—标本移动器

显微镜从柜子内拿出时，需用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜放置于实验台上，距实验台边缘约10cm，位于操作人员的左前方，右侧可放记录本。接通电源，打开电源开关，调节亮度然后升降聚光器，开启虹彩光圈，将光线调至合适的亮度。光学显微镜构造如图2－12所示。

2）低倍镜观察

镜检任何标本都必须养成先用低倍镜观察的习惯。因为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定检查的位置。

放置标本或载玻片于载物台上，并用压片夹固定住，调节标本移动器，使被观察的标本位于光路范围之内，降下低倍物镜，使其下端接近于玻片。转动粗准焦螺旋，上升载物台，使物镜调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗准焦螺旋慢慢升起镜筒（或下降载物台），直至物像出现，再用细准焦螺旋调节，使物像清晰为止，观察菌体的形态。

3）高倍镜观察

因为显微镜的低倍、高倍镜头是共焦的，所以在低倍物镜观察的基础上可直接转换高倍物镜，转换时必须用物镜转换器而不可用手扳镜头（图2－13），当听到“咔嚓”一声即表明物镜已经转到了正确的位置上。在正常情况下，高倍物镜的转换不应碰到载玻片或其上的盖玻片，所以在转换物镜时要从侧面观察，避免镜头与玻片相撞或相擦。然后从目镜观察，调节光照，使亮度适中，这时，只要再稍微调节一下细准焦螺旋就可看到清晰的物像，观察并绘制形态图。

图2－13　物镜转换器使用方法

（a）不正确的操作；（b）正确的操作

图2－14　显微镜用毕物镜正确置放位置

4）油镜观察

油浸物镜的工作距离（指物镜前透镜的表面到被检物体表面的距离）很短，一般在0．2mm以内，因此在使用油浸物镜时要特别小心，避免由于“调焦”不慎而压碎标本片并使物镜受损。油镜使用按下列步骤操作。

（1）先用粗准焦螺旋提起镜筒（或降低载物台）约2cm，将油镜镜头转至正下方。在玻片标本上的镜检部位滴一滴香柏油。

（2）从侧面观察，用粗准焦螺旋将载物台缓缓地上升，使油镜镜头浸入香柏油中，镜头几乎与标本接触。必须注意，上升载物台不能用力过猛，否则会压碎玻片，还易损坏镜头。

（3）从目镜观察，先调节光线，将虹彩光圈开到最大，再用细准焦螺旋将载物台慢慢下降，至视野出现物像为止，然后用细准焦螺旋调准焦距，使物像清晰。如果镜头已离开油面但仍未出现物像，必须再从侧面注视，将载物台缓缓提起，重新操作，直至出现物像为止。

（4）仔细观察菌体形态并绘图。

（5）观察完毕，下降载物台，取下玻片，将油镜镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留的油迹，最后用擦镜纸擦去镜头上残留的二甲苯（朝一个方向擦拭2～3下即可）。

2．显微镜的维护

1）日常维护

详见模块一项目1．3的任务1。

2）使用注意事项

使用时，一定要正确操作，小心谨慎。操作时粗心大意或操作方法错误都会引起仪器的损坏。

（1）取送显微镜时一定要一手握住镜臂，另一手托住镜座，轻拿轻放。显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑落。

（2）使用高倍镜观察液体标本时，一定要加盖玻片。否则，不仅清晰度下降，而且试液容易浸入镜头内，使镜片遭受污染和腐蚀。

（3）细准焦螺旋是显微镜机械装置中较精细而又易损坏的元件，拧到限位后不可再强拧，否则必然造成损坏。调焦时遇此情况，应将细准焦螺旋退回3～5圈后，重用粗准焦螺旋调焦，待初见物像后，再改用细准焦螺旋。

（4）转换物镜时，不能扳动物镜镜头，只能转动物镜转换器。

（5）油镜在使用后一定要及时擦拭干净。香柏油在空气中暴露时间过长，就会变得黏稠和干涸，很难擦拭。镜片上留有油渍，清晰度必然下降。

（6）仪器出了故障，不可勉强使用，否则可能会引起更大的故障和不良后果。如粗准焦螺旋不灵活时，若强行旋动，会使齿轮、齿条变形或损坏。

（7）不用时将物镜转成“八”字形（图2－14），载物台降至最低，套上保护罩。

3）机械系统的维护

显微镜表面涂漆部分可用布擦拭，但不能使用酒精、乙醚等有机溶剂擦，以免脱漆。没有涂漆的部分若有锈，可用布蘸汽油擦去，擦净后重新上好防护油脂即可。

4）光学系统的维护

对显微镜的各光学部分的表面，用干净的毛笔清扫或用擦镜纸擦拭干净即可。在镜片上有抹不掉的污物、油渍或手指印时，或镜片生霉、生雾以及长期停用后复用时，都需要先进行擦拭再使用。

5）定期检查

为了保护显微镜的性能稳定，要定期进行检查和保养。