六、操纵子:原核转录的精密调控
1.画出E.coli细胞在葡萄糖和乳糖混合培养基中的生长曲线。曲线中的每一段分别表示什么?
2.分别画出乳糖操纵子负调控和正调控的结构图。
3.β-半乳糖苷酶和半乳糖苷通透酶的功能分别是什么?
4.为什么乳糖操纵子的正负调控对E.coli能量利用效率非常重要?
5.用实验证明乳糖操纵子的操纵区是抑制物的结合位点。
6.用实验证明聚合酶可以结合到乳糖操纵子启动子,甚至在抑制物结合在操纵区之后也可以发生。
7.用实验证明lac抑制物可以阻止RNA聚合酶结合到lac启动子上。
8.如何知道三个lac操纵基因都为完全抑制所必需?如果剔除其中一个或两个辅助操纵基因,将会有什么结果?
9.用实验证明cAMP刺激β-半乳糖苷酶合成水平的变化,实验中使用野生型和突变型提取物,其中突变型降低CAP和cAMP之间的亲和力。
10.简述CAP-cAMP增强lac转录的假说。假说中要包括聚合酶α亚基C端结构域。
11.用电泳实验证明CAP-cAMP的结合使lac启动子区弯曲。
12.有无其他证据证明CAP-cAMP的结合使DNA弯曲。
13.用一个模型解释DNA弯曲可以激活转录。
14.用一个模型说明CAP对mal调节子的激活。
15.给出14题模型的实验证据。
16.解释下列现象:当在araBAD操纵子的araO2和araI之间插入整倍的DNA螺旋转角(helicalturn,10.5bp整倍体)时,AraC可以产生抑制作用;而当插入非整倍的螺旋转角(helicalturn)时,则阻止抑制的产生。并用图示说明该现象。
17.作图说明阿拉伯糖是如何减少araBAD操纵子的抑制作用。在阿拉伯糖存在和不存在两种情况下,AraC分别位于何处?
18.用实验证明阿拉伯糖可以解开AraC形成的抑制环。
19.用实验证明araO2和araI都参与抑制环的形成。
20.用实验证明:当去除掉阿拉伯糖后,被解开的抑制环又可以恢复。
21.用实验证明:当DNA处于非环状结构,而不是环状结构时,araI2对AraC的结合非常重要。
22.说出一个模型解释trp操纵子的负调控过程。
23.说出一个模型解释trp操纵子的衰减过程。
24.为什么trp前导区的翻译不能简单地延续到trp结构基因的翻译?
25.当色氨酸缺乏时,trp是如何越过衰减过程的?
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