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中国科学家在人工合成转移核糖核酸的工作中

时间:2023-02-10 百科知识 版权反馈
【摘要】:已知有几种酶可以用于RNA合成。利用核糖核酸酶N1、T1、U2和牛胰核糖核酸酶A等核酸水解酶的逆反应,在适当条件下,也可以合成某些RNA小片段。T4噬菌体感染大肠杆菌后产生的T4RNA连接酶,是RNA大分子合成中最重要的一个工具酶,它能催化带有5′-磷酸的RNA片段同另一个带有3′-羟基的RNA片段之间的单链连接反应,不仅能够合成RNA小片段,也能合成RNA大片段。
酶促合成_生物技术辞典

酶促合成

通过酶促反应可以把化学合成的小片段连接成为大片段,或是从已经合成的单链制成双链,它可以加快合成工作的进展,使人工合成核酸大分子的目标得以顺利地实现。

大肠杆菌DNA连接酶和T4噬菌体DNA连接酶是两种经常使用的DNA连接酶。大肠杆菌的DNA连接酶要求两个被连接片段的末端上有几个互补的碱基(称为粘性末端),否则就不能连接。

T4DNA连接酶不但可以连接带有粘性末端的DNA片段,也可以连接平头的末端。

已知有几种酶可以用于RNA合成。多核苷酸磷酸化酶能够以2′位上保护的核苷二磷酸为底物,在一个三核苷二磷酸的引物片段上接长一个核苷酸,以得到的产物作引物,经过同样循环,可以合成更长一些的RNA片段。利用核糖核酸酶N1、T1、U2和牛胰核糖核酸酶A等核酸水解酶的逆反应,在适当条件下,也可以合成某些RNA小片段。T4噬菌体感染大肠杆菌后产生的T4RNA连接酶,是RNA大分子合成中最重要的一个工具酶,它能催化带有5′-磷酸的RNA片段(又称供体)同另一个带有3′-羟基的RNA片段(又称受体)之间的单链连接反应,不仅能够合成RNA小片段,也能合成RNA大片段。

中国科学工作者在人工合成转移核糖核酸的工作中曾经对RNA的酶促合成反应,特别是对有关T4RNA连接酶催化合成RNA的最适反应条件进行过深入的研究,他们在化学合成或化学加酶促合成的RNA小片段的基础上利用T4RNA连接酶先合成得到6个较大的片段,然后再进一步连接成两个半分子并最后实现酵母丙氨酸转移核糖核酸的全合成。

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