【摘要】：50mmol/L连苯三酚溶液：以配制25mL为标准，称取该粉末0．157 6g，用事先用双蒸水配制的0．01mol/L HCl溶液溶解，后定容至25mL，遮光保存。测定其A值的变化ΔA酶/min，并作记录。13．2．3．3 SOD酶活性计算（注：酶活性定义——25℃时，1mL反应液中每1min抑制连苯三酚自氧化速率达50%时的酶量为一个活性单位。
微量连苯三酚法（法）_超氧化物歧化酶
13．2．3 微量连苯三酚法（325nm法）
13．2．3．1 溶液的配制
（1）pH为8．20的50mmol/LTris－HCl缓冲液（内含1mmol/L EDTA－2Na）［后文简称Tris－HCl缓冲液］：以配制2 000mL为标准，分别用分析天平称取Tris粉末13．114g，EDTA－2Na粉末0．744g，用双蒸水溶解稀释至1 800mL左右，用HCl溶液滴定至pH为8．20（用pH计校正），最后定容至2 000mL，冷藏保存。
（2）50mmol/L连苯三酚溶液（溶于0．01mol/L HCl中）（后文简称连苯三酚）：以配制25mL为标准，称取该粉末0．157 6g，用事先用双蒸水配制的0．01mol/L HCl溶液溶解，后定容至25mL，遮光保存。
13．2．3．2 测定方法
取3支试管（分别标号0，1，2）各加入3mL Tris－HCl缓冲液，25℃保温20min，在“1”中加入预热过的连苯三酚10μL左右，同时计时，速以“0”溶液作空白对照，用752或754分光光度计（λ＝325nm）测定4min内每1min A值的变化ΔA连325/min，并作记录，然后在“2”中先加入预热的SOD酶液，摇匀，再加入连苯三酚如上述相同体积，方法同上。测定其A值的变化ΔA酶/min，并作记录（一般控制连苯三酚自氧化速率ΔA连/min＝0．07左右，控制SOD抑制连苯三酚自氧化速率ΔA酶/min在50%左右）。
13．2．3．3 SOD酶活性计算
（注：酶活性定义——25℃时，1mL反应液中每1min抑制连苯三酚自氧化速率达50%时的酶量为一个活性单位。）
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