尿蛋白定性与半定量检验

八、尿蛋白定性与半定量检验

（一）实验目的

了解蛋白质沉淀反应及变性的实践意义，掌握临床常规定性检验尿蛋白的方法。

（二）实验原理

正常人尿中只含微量蛋白质，不能用临床常规方法测定出来，用临床常规方法能检查出蛋白质的尿叫做蛋白尿。患肾脏病（如患肾小球肾炎、肾盂肾炎）的人往往有蛋白尿，因而尿中蛋白质的检查在临床上具有重要的诊断意义。

（三）实验药品

1．2％醋酸溶液；

2．20％磺基水杨酸溶液；

3．pH蛋白试纸。

（四）实验方法

1．加热醋酸法

尿中的蛋白质加热变性后溶解度降低，因此可以被沉淀出来，加入醋酸使尿液呈弱酸性后，若沉淀消失，表示沉淀物质是磷酸盐；如沉淀不消失，反而更明显，则表示尿中有蛋白质。有时，煮沸后虽不浑浊，但加酸后浑浊出现，也表示有蛋白质。

取尿液3mL置于试管中，加热至沸腾（试管应在火焰上移动，严防尿液喷出）。观察有无沉淀产生。若产生沉淀，则加入2％醋酸数滴使其显酸性，然后观察沉淀情况。按表2-8记录结果。

表2-8　尿蛋白的半定量测量

2．磺基水杨酸法

利用有机酸沉淀蛋白质，是临床常用的方法。此法较“加热醋酸法”更为灵敏。尿中蛋白质浓度为0.0015％，即可检出。

（1）取尿液约3mL加入试管中；

（2）加入20％磺基水杨酸8～10滴，如出现沉淀，表示尿中有蛋白质存在。参考上表，按沉淀多少记录结果。

3．试纸法

蛋白质与有机染料（如溴酚篮）的离子结合，可改变染料的颜色。使上述染料附着在滤纸上面制成蛋白试纸。当它接触含有蛋白质的溶液时，因蛋白质含量不同，试纸可以由黄色变成黄绿色、绿色或蓝绿色，可根据颜色估计蛋白质的量。

（1）本试纸供检查尿pH值及蛋白定性和半定量之用，其淡黄色部分供检查pH值用。

（2）将本试纸浸入被检尿中后立即取出。约10s钟后，在自然光或白光下，将所呈现的颜色和色版比较。

（3）强碱性尿的pH值在8以上者，尿蛋白呈假阳性反应，可滴加稀醋酸校正后再测定。

（4）黄胆尿、浓缩尿及血尿等异常着色的标本，可影响判定。

（5）蛋白试纸应存于阴凉干燥处，其带色部分不可用手接触。

（五）实验记录