尿生成影响因素的分析

实验五　尿生成影响因素的分析

实验目的

观察神经、体液因素对尿生成的影响，进一步认识和理解尿生成的调节。

实验原理

尿生成的过程包括肾小球滤过，肾小管和集合管的重吸收以及肾小管、集合管分泌三个环节。任何影响这些过程的因素都会影响尿液的生成，引起尿量的变化。影响肾小球滤过的主要因素有有效滤过压（肾小球毛细血管压、肾小囊囊内压、血浆胶体渗透压）、肾血浆流量以及滤过膜的面积与通透性。临床上常常通过观察尿量来了解患者的肾脏、血压等情况，亦用来作为重症或休克患者的监护指标。

实验对象

家兔。

实验器材与药品

BL－420生物信号采集与处理系统；压力换能器、刺激电极、计滴器；哺乳类动物手术器械1套、兔手术台、动脉夹、动脉插管和输尿管插管、铁架台、培养皿；注射器（1mL、20mL）、静脉注射滴定管；尿糖试纸、生理盐水、纱布、20%葡萄糖、1∶10 000去甲肾上腺素、1%肝素盐水溶液、20%氨基甲酸乙酯溶液、1%呋塞米、神经垂体素。

实验步骤

1．麻醉与固定

家兔称重。家兔耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯溶液（5mL／kg）进行麻醉，待家兔麻醉后，将其仰卧位固定于兔手术台上。剪去颈部、下腹部的毛。

2．手术

1）分离颈部的神经和血管，行颈总动脉插管

沿颈正中线切开皮肤5～7cm，钝性分离皮下组织和肌肉，暴露气管并进行气管插管。在气管两侧，分离出右侧迷走神经和两侧颈总动脉，穿线备用。把充满肝素盐水溶液的动脉插管插到左侧颈总动脉内，结扎固定，留待记录血压的变化。

2）尿液收集方法

（1）膀胱插管　从耻骨联合向上，将下腹部中线的皮毛剪掉，沿腹白线自耻骨联合向上作一长约3cm的切口，打开腹腔；找到膀胱，将膀胱拉出腹壁外，仔细辨认输尿管，分离其周围组织，在输尿管下方穿线，然后将膀胱上提，用线结扎膀胱出口，以防尿液从尿道排出。在膀胱顶部避开血管做一切口（图4－5），插入膀胱插管，并用线结扎固定。将其插管连接到记滴器上。

图4－5　膀胱切口

（2）尿道插管导尿法　将用液体石蜡润滑头端的导尿管，从尿道外口经尿道插入膀胱，可见尿液流出。将导尿管连接到计滴器上，计滴器的引导连线插入“计滴”插孔。

（3）输尿管插管　在耻骨联合上缘向上沿正中切线切开皮肤4～8cm，剪开腹壁（勿损伤腹内脏器），在膀胱底部找出两侧输尿管，把一根已充满生理盐水的输尿管插管插入输尿管，结扎固定。按相同的方法，插入另一侧输尿管；用线把两侧插管的另一侧开口端结扎在一起，并接入计滴器的玻璃管内。手术完毕后，用生理盐水纱布覆盖腹部创口。把连接计滴器的输入线插到电脑BL－420生物信号采集与处理系统前面板的计滴输入插口，记录尿滴数。

3）使用BL－420生物信号采集与处理系统

选择“实验项目”菜单中的“泌尿实验”菜单项，以弹出“泌尿实验”子菜单。在“泌尿实验”子菜单中选择“影响尿生成的因素”实验模块。启动信号采集，观察并记录血压和尿滴信号。根据信号窗口中显示的波形，再适当调节实验参数以获得最佳的实验效果。

实验观察项目

（1）记录尿量、血压的正常数据。

（2）静脉注射生理盐水：从耳缘静脉缓慢输入38℃生理盐水20～50mL，观察血压和尿量的变化。

（3）电刺激迷走神经外周端：在尿量恢复后，电刺激迷走神经外周端（在“设置刺激器参数”对话框中调节实验参数，采用串脉冲刺激，电压2～10V，频率5～30Hz，串长10～30个。调节完毕，单击工具条上的“启动停止刺激”命令按钮），使血压明显下降（降至约6．8kPa或50mmHg）15～20s，观察血压和尿量的变化。

（4）静脉注射葡萄糖与尿糖定性实验：取尿液2滴至尿糖试纸，观察颜色变化。然后静脉注射20%葡萄糖5mL，观察血压和尿量的变化。待尿量明显增多时，再取尿液2滴做尿液定性实验。

（5）静脉注射去甲肾上腺素：静脉注射1∶10 000去甲肾上腺素0．2mL，观察血压和尿量的变化。

（6）静脉注射呋塞米：静脉注射1%呋塞米0．5mL／kg，5min后观察血压和尿量的变化。

（7）静脉注射神经垂体素：静脉注射神经垂体素2U，观察血压和尿量的变化。

（8）右侧颈总动脉放血：做右侧颈总动脉插管，结扎固定。从右侧颈总动脉放血至血压明显下降，观察尿量变化。

（9）从右侧颈总动脉输回所放的血：观察输血过程中尿量的变化。

注意事项

（1）实验前多喂家兔水和蔬菜，以增加基础尿量。

（2）严格按照本实验步骤顺序做实验，以更好地观察各因素对血压和尿量的影响效果。

（3）在前一项实验处理的作用基本消失以后，再做下一项实验。

（4）注射20%葡萄糖后，应用新的容器来盛尿，以便做尿糖测定。

（5）盛接动脉放血的容器应加入一定量的肝素抗凝，并在放血过程中，轻轻摇动容器以使肝素和血液均匀地混合。

（6）分离输尿管时要小心，避免把血管错当输尿管；输尿管插管时应避免将插管插入管壁的肌层，插管后观察是否有尿液流出，借以判断导管是否插入到管腔内。

思考题

1．对于休克肾患者，使用呋塞米后未能增加尿量，能否继续加大该药使用剂量？为什么？

2．想一想电刺激迷走神经与放血对尿生成的影响有何不同？其机制是怎样的？

3．切除动物的一侧肾脏，尿生成会有什么影响，为什么？

（王晓梅　张　健　李　慧）