实验实训十五 光合速率的测定
一、实训目标与内容
(一)实训目标
1.了解光合速率的原理
2.掌握改良半叶法测定叶片光合速率的方法
(二)实训内容
1.改良半叶法测定叶片光合速率
2.破坏韧皮部测定叶片的光合强度
二、实验原理
叶片中脉两侧的对称部位,其生长发育基本一致,功能接近。如果让一侧的叶片照光,另一侧不照光,一定时间后,照光的半叶与未照光的半叶在相对部位的单位面积干重之差值,就是该时间内照光半叶光合作用所生成的干物质量。
在进行光合作用时,同时会有部分光合产物输出,所以有必要阻止光合产物的运出。由于光合产物是靠韧皮部运输,而水分等是靠木质部运输的,因此如果破坏其韧皮部运输,但仍使叶片有足够的水分供应,就可以较准确地用干重法测定叶片的光合强度。
三、实训材料与用品
实训材料:生长着的植株。
实训仪器与用具:打孔器、分析天平、称量皿、烘箱、脱脂棉、锡纸、毛巾、剪刀、纸牌。
实训试剂:5%三氯乙酸、90℃以上的开水。
四、操作与观察
(一)选择测定样品
在田间选定有代表性的叶片若干,用小纸牌编号。选择时应注意叶片着生的部位、受光条件、叶片发青是否对称等。
(二)叶子基部处理
棉花等双子叶植物的叶片,可用5%三氯乙酸涂于叶柄周围。小麦、水稻等单子叶植物,可用在90℃以上开水浸过的棉花夹烫叶片下部的一大段叶鞘20秒。如玉米等叶片中脉较粗壮,开水烫不彻底的,可用毛笔蘸烧至110℃~120℃的石蜡烫其叶基部。为使烫伤后的叶片不致下垂,可用锡纸或塑料包围之,使叶片保持原来着生的角度。
(三)剪取样品
叶子基部处理完毕后,即可剪取样品,一般按编号次序分别剪下叶片的一半(不要伤及主脉),包在湿润毛巾里,贮于暗处,也可用黑纸包住半边叶片,待测定前再剪下。
过4~5小时,再按原来次序依次剪下照光另半边叶,也按编号包在湿润的毛巾中。
(四)称重比较
用打孔器在两组同号的半叶的对称部位打若干圆片(有叶面积仪的,也可直接测出两半叶的叶面积),分别放入两个称量皿中,在110℃下杀青15分钟,再置于70℃烘箱至恒重,冷却后用分析天平称重。按表填入测定数据,并计算。
表 用改良半叶法测定植物光合速率的记载表
(五)结果计算
两组叶圆片干重之差值,除以叶面积及照光时间,得到光合强度。
即,光合速率=(W2-W1)/S×T(mg·dm-2·h-1)
式中,W2——照光圆片干重(mg);
W1——未照光圆片干重(mg);
S——圆片总面积(dm);
T——照光时间(h)。
五、注意事项
选择外观对称的植物叶片,以免两侧叶生长不一致,导致误差。
选择的叶片应光照充足,防止因太阳高度角的变化而造成叶片遮阳。
涂抹三氯乙酸的量或开水烫叶柄的时间应适度,过轻达不到阻止同化物运转的目的,过重则会导致叶片萎蔫降低光合。
应有若干张叶片为一组进行重复。
六、作用与思考题
如果将开始时剪下的半片叶立即取圆片烘干并称重,计算后得出的数据是哪种光合速率。
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