马铃薯脱毒快繁技术

实训十二　马铃薯脱毒快繁技术

一、实训目的

学习和掌握马铃薯的脱毒与快繁技术。

二、实训条件及用具

材料：马铃薯。

用具：超净工作台、高压灭菌锅、天平、量筒、烧杯、镊子、剪刀等。

试剂：MS培养基+0.1mg/L～0.2mg/LIAA+0.1mg/L～0.2mg/L6-BA+3%蔗糖+0.05mg/LGA₃；75%酒精、0.1%多菌灵、0.1%升汞、10%次氯酸钠等。

三、实训步骤

（一）优良母株选择

选择适宜当地栽培的高产优质、生长健壮的马铃薯品种植株为母株，取枝条，剪去叶片后切成数段，每段带有一个腋芽，含顶芽2～3节。

（二）材料消毒

剪好的茎段经流水冲洗数分钟，用滤纸吸干表面水分后于75%酒精浸泡10小时，再用0.1%多菌灵浸泡10分钟，再用0.1%升汞溶液消毒10分钟，无菌水冲洗5次。

（三）茎尖切割

将消毒好的茎放在解剖镜下，无菌剥去顶芽和腋芽上较大的幼叶，切取0.3～0.5mm含1～2个叶原基的茎尖组织，接种在培养基上。

（四）茎尖培养

培养基：MS培养基+0.1mg/L～0.2mg/LIAA+0.1mg/L～0.2mg/L 6-BA+3%蔗糖+0.05mg/LGA₃，pH5.6～6.0。

培养条件：温度25℃～28℃，光照1500～2000lx，光照每天14小时。

（五）茎尖苗的初级快繁

当薯苗长至3～6cm时，将小植株切段进行短枝扦插，除顶芽一般带1～2片展开叶片外，其余的切段都是具一节一叶的短枝。切段直插于培养瓶内无植物生长物质的MS培养基中，条件同茎尖培养。2～3天内，切段基部即产生不定根，30天左右长成具有6～8片展开叶试管苗。

（六）脱毒鉴定

茎尖培养产生的试管苗，经严格检测后，才能确认为脱毒苗。

确认脱毒苗是否带毒及其种类常用的方法有：指示植物鉴定法、电子显微镜鉴定法、血清学检测法等。

四、完成实训报告