生物化学实验常用器材及操作

项目二　生物化学实验常用器材及操作

一、生物化学实验常用器材

烧杯（beaker）、试管（test tube）、离心管（centrifuge tube）、刻度吸量管（scaled pipet）、滴管（dropper）、搅拌棒（stirring rod）、漏斗（funnel）、混匀器（vortex）、恒温水浴箱（water bath）、离心机（centrifuge）、分光光度计（spectrophotometer）、可调式移液器（pipettman）等。

二、基本操作及要求

（一）玻璃仪器的洗涤

1.洗涤

各种玻璃仪器的清洁程度直接影响实验结果的准确性。应根据实验要求、污物性质和玷污程度选用合适的清洁方法。

（1）非定量敞口玻璃仪器，如试管、离心管、烧杯等，均可直接用毛刷蘸洗涤灵或洗衣粉刷洗，然后用自来水反复冲洗干净，最后用少量蒸馏水洗3遍。

注意：洗前检查毛刷顶端铁丝是否裸露，洗刷时不可用力过猛，以免损坏仪器。

（2）定量玻璃仪器，如滴管、吸量管等。先用自来水冲洗晾干，然后于洗液中浸泡数小时，取出沥净洗液后，再用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3遍。

（3）比色杯用毕立即用蒸馏水反复冲洗，避免用碱液或强氧化剂清洗，切不可用试管刷或粗糙布（纸）擦拭。

2.清洁的标准

玻璃仪器洗净，以倒置后内壁不挂水珠为清洁标准。

（二）基本操作

1.吸量管

（1）吸量管的分类：每根刻度吸量管上有许多等分的刻度，刻度标记有自上而下和自下而上两种，规格为0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、2mL、5mL、10mL等。

（2）吸量管的选取原则：在一次完成移液的前提下，应选用容量较小的吸量管；对于在同一次实验中同一种试剂的移取，应选用同一根吸量管。

（3）刻度吸量管的操作：

①执管：拇指、中指执吸量管上部，使吸量管保持垂直，示指按吸量管上口调节流速，刻度朝向操作者。

②取液：将吸量管插入液体，用洗耳球吸取液体至所需量取刻度上方，移开洗耳球，迅速用食指压紧管口，然后抽离液面（必要时用小滤纸片将管尖端外围拭净）。

③调准刻度：用示指控制液体至所需刻度（此时液体凹面、视线和刻度应在同一水平线上）。

④放液：移开示指，让液体自然流入容器内。此时，管尖应接触容器内壁，但不应插入容器的原有液体中（否则管尖会沾上容器内试剂，再移液时致使试剂交叉污染）。待液体流尽，将最后液滴吹出或转动吸量管使其沿容器内壁流出。

⑤洗涤：吸取血浆、尿及黏稠试剂的吸量管，用后应及时用自来水冲洗干净。如果吸取一般试剂的吸量管，可待实验完毕后再洗。

注意事项：对于刻度自上而下的吸量管应尽量使用上端刻度；管尖残液是否须吹出，应视具体情况而定。一般来说，1mL及1mL以下的均须吹出；大于1mL的视标记而行。如吸量管上方标有“吹”或“◇”形符号，则残液须吹出；如标有“快”字，应使残液自然流下。

2.可调式移液器的使用

移动调节轮至所需体积值；套上枪头，旋紧；垂直持握可调式移液器并用大拇指按至第一挡；将枪头插入溶液，徐徐松开大拇指，使其复原；将可调式移液器移出液面，必要时可用纱布或滤纸拭去附于枪头表面的液体；排放时，重新将大拇指按下，至第一挡后，继续按至第二挡以排空液体。

注意事项：移取另一种样品时，按卸尖按钮弃掉枪头，并更换新枪头。

3.离心机的使用

（1）离心前的检查：取出所有套管，启动空载的离心机，观察是否转动平稳；检查套管有无软垫，软垫是否完好，内部有无异物；离心管与套管是否匹配。

（2）离心原则：

①平衡：将一对离心管放入一对套管中，置于天平两侧，用滴管向较轻一侧的离心管与套管之间滴水至两侧平衡。

②对称：将已平衡好的一对管置于离心机中的对称位置上。

（3）离心操作：对称放置平衡后的一对管，取出多余的套管，盖严离心机机盖。调节转速调节钮，逐渐增加转速至所需值，记录时间。离心完毕后，缓慢将转速调回零。待离心机停稳后取出离心管，并将套管中的水倒净，所有套管放回离心机中。

（4）注意事项：离心机的启动、停止都要慢，否则离心管易破碎，液体易从离心管中溅出。在离心过程中，若听到特殊响声，应立即停止离心，检查离心管。若离心管已碎，应清除并更换新管；若管未碎，应重新平衡。

（三）混匀

样品和试剂的混匀是保证化学反应充分进行的一种有效措施。为使反应体系内各物质迅速地接触，必须借助于外力的机械作用。常用的混匀方法有以下几种。

（1）旋转法：手持容器，使溶液作离心旋转。适用于未盛满液体的试管或小口器皿。

（2）指弹法：一只手执试管上部，另一只手轻弹试管下部，使管内溶液作漩涡状运动。

（3）搅动法：使用干玻璃棒搅匀，多用于溶解烧杯中的固体。

（4）混匀器法：将容器置于混匀器的振动盘上，逐渐用力下压，使内容物旋转。

注意事项：混匀时谨防容器内液体溅出或被污染；严禁用手堵塞管口或瓶口加以振摇。