任务1 无菌室的基本要求
图1-2 无菌室一角
1.无菌室的结构
无菌室入口应避开走廊,通常包括缓冲间和工作间两大部分。无菌室的面积和容积不宜过大,以适宜操作为准,一般可为9~12m2(应按每个操作人员占用面积不少于3m2设置)。缓冲间与工作间二者的比例可为1∶2,高度以2.5m左右为宜。工作间与缓冲间均装有紫外灯,要求每3m2安装30W紫外灯一盏;工作间内设有固定的工作台,紫外灯距工作台面要小于1.5m;工作间内应设有空气过滤装置、通风装置、空调设备、空气净化装置,以便在进行操作时切实达到无尘无菌。工作间的内门与缓冲间的门尽量迂回,避免直接相通,减少无菌室内的空气对流,以保持工作间的无菌条件。窗户应装有双层玻璃,以防外界的微生物进入。无菌室与实验实训操作室之间可设双层窗构成小通道。图1-2为无菌室一角。
2.无菌室的要求
(1)无菌室内墙壁应光滑,尽量避免死角,便于洗刷消毒。
(2)应保持密封、防尘、清洁、干燥。操作时尽量避免走动。
(3)室内设备简单,禁止放置杂物。
(4)工作台、地面和墙壁应用新洁尔灭或过氧乙酸溶液擦洗消毒。
(5)无菌室内应备有专用开瓶器、金属勺、镊子、剪刀、接种针、接种环,每次使用前后应在酒精灯火焰上烧灼灭菌。
(6)杀菌前做好一切准备工作,然后用紫外线杀菌灯进行空气消毒。开灯照射30 min后方可进入室内工作。
(7)无菌室内应备有盛放3%来苏尔或5%石炭酸溶液的玻璃缸,内浸纱布数块,还应备有75%酒精棉球,用于样品表面消毒及意外污染消毒。无菌室每次使用前后都要用紫外灯照射。
(8)根据无菌室的净化情况和空气中含有的杂菌种类,可采用不同的化学消毒剂。如果霉菌较多,先用5%石炭酸溶液全面喷洒室内,再用甲醛熏蒸;如果细菌较多,可采用甲醛与乳酸交替熏蒸。一般情况下也可酌情间隔一段时间用2mL/m3甲醛溶液或20 mL/m3丙二醇溶液熏蒸消毒。
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