【摘要】：也可将脱水后的微生物悬浮在要结合的酶溶液中，使酶沉淀在重新水化的细胞壁上，然后脱水，再加入戊二醛和单宁，使酶与细胞交联在一起，形成共固定化。
微生物酶与细胞共固定化_环境工程微生物实
三、微生物酶与细胞共固定化
利用交联剂将微生物细胞与一种或几种其他来源的酶结合起来，形成一种结合型的固定化催化剂。这种共固定化技术可以充分利用细胞和酶各自的特点，并能把不同来源的酶和整个细胞的生物催化性质结合起来，充分发挥细胞内、外两种不同性质酶联合催化性质，而且方法简单，成本低，固定化颗粒小，比活性高，热稳定性好，氧利用效果好，产物转化效率高。
用碳化二亚胺作交联剂，把酶共价结合到海藻酸钠上，然后加入微生物细胞混合均匀后，滴加到氯化钙溶液中，形成直径为2～3mm含有细胞和酶的共固定化颗粒。也可将脱水后的微生物悬浮在要结合的酶溶液中，使酶沉淀在重新水化的细胞壁上，然后脱水，再加入戊二醛和单宁，使酶与细胞交联在一起，形成共固定化。
将微生物细胞体用去离子水离心洗涤2次，然后再用异丙醇在5℃下处理，以增强透性，而后在30℃下真空干燥，得5g干细胞体，然后用边搅拌边悬浮的方法使其悬浮于50ml含有0．4g的卵清蛋白和20ml酶浓缩液（酶活为2 600BU）中，接着再添加80ml异丙醇和8ml戊二醛（25%W/W）混合物，并在25℃下振荡培养2小时，离心或过滤收集细胞体，再用去离子水于5℃下洗涤2次，再悬浮于0．1M柠檬酸－0．2M磷酸缓冲液中，就可获得酶——细胞结合型固定化生物催化剂。
思考题
1．微生物细胞的固定化技术有哪些？各自有何特点？
2．海藻酸钙凝胶包埋法的操作步骤与注意事项有哪些？
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