一、核酸及蛋白质常用数据
1.核苷三磷酸的物理常数
2.常用核酸的长度与相对分子质量
3.常用核酸蛋白换算数据
（1）质量换算：
1 μg＝10－6 g 1 pg＝10－12 g
1 ng＝10－9 g 1 fg＝10－15 g
（2）分光光度换算：
1A260双链DNA＝50 μg/mL
1A260单链DNA＝30 μg/mL
1A260单链RNA＝40 μg/mL
（3）DNA物质的量换算：
1 μg 100 bp DNA＝1.52 pmol＝3.03 pmol末端
1 μg pBR32 DNA＝0.36 pmol
1 pmol 1000 bp DNA＝0.66 μg
1 pmol pBR322＝2.8 μg
1 kb双链DNA（钠盐）＝6.6×105 Dal
1 kb单链DNA（钠盐）＝3.3×105 Dal
1 kb单链RNA（钠盐）＝3.4×105 Dal
（4）蛋白物质的量换算：
100 pmol相对分子质量为100000蛋白质＝10 μg
100 pmol相对分子质量为50000蛋白质＝5 μg
100 pmol相对分子质量为10000蛋白质＝1 μg
氨基酸的平均相对分子质量＝126.7 Dal
（5）蛋白质/DNA换算：
1 kb DNA＝333个氨基酸编码容量＝3.7×104mW蛋白质
10000mW蛋白质＝270 bp DNA
30000mW蛋白质＝810 bp DNA
50000mW蛋白质＝1.35 kb
100000mW蛋白质＝2.7 kb DNA
二、常用缓冲液
1.分子克隆常用缓冲液
2.磷酸缓冲液
（1）25 ℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※
（2）25 ℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※
※：用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000mL，根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值：
pH＝pK′＋1 g（［质子受体］/［质子供 体］）
在此，pK′＝6.86（25 ℃）。
3.电泳缓冲液
常用的电泳缓冲液
说明：
① TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废 弃。
以片都以1×TBE作为使用液（即1 ：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1 ：10稀释的贮存液作为使用 液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。
② 碱性电泳缓冲液应现用现配。
③ Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2×SDS凝胶加样缓冲液：
100mmol/L Tris·HCl（6.8）
200mmol/L二硫苏糖醇（DTT）
4%SDS（电泳级）
0.2%溴酚蓝
20%甘油
不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温，应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。
4.凝胶加样缓冲液
续表
使用以上凝胶加样缓冲液的目的是：一是增大样品密度；二是确保DNA均匀进入样品孔内；三是使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2.2倍，而与琼脂糖浓度无关。以0.5×TBF作电泳液时，溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300 bp的双链线状DNA相同，而二甲苯青FF的泳动则与长4 kb的双链线状DNA相同。在琼脂糖浓度为0.5%～1.4%的范围内，这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显 著。
选用哪种加样染料均可。但是，对碱性凝胶应使用溴甲酚绿作为示踪染料，因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝更鲜明。
5.各种pH值的Tris缓冲液的配制
续表
某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50mL 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：mL）的0.1mol/L HCl混合，加水将体积调至100mL。
三、常用抗生素溶液
a：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22 μm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液不需要除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器内保 存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
四、常用贮存液的配制
1mol/L CaCl2溶液
【配制方法】
在200mL蒸馏水中溶解54 g CaCl2·6H2O，用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成10mL小份贮存于－20 ℃。
【注意】制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100mL，用Nalgene滤器（0.45 μm孔径）过滤除菌，然后骤冷至0 ℃。
2.5mol/L CaCl2溶液
【配制方法】
在20mL蒸馏水中溶解13.5 g CaCl2·6H2O，用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成1mL小份贮存于－20 ℃。
脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液
【配制方法】
把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L，用微量移液器吸取0.05mol/L Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH为7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种dNTP溶液各取一份适当稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分装成小份贮存于－70 ℃。
0.5mol/L EDTA（pH8.0）溶液
【配制方法】
在800mL水中加入186.1 g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na·2H2O），用磁力搅拌器进行剧烈搅拌，用NaOH调节溶液的pH值至8.0（约需20 g NaOH颗粒）然后定容至1 L，分装后高压灭菌备用。
【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶 解。
IPTG溶液
【配制方法】
IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（相对分子质量为238.3），在8mL蒸馏水中溶解2 g IPTG后，用蒸馏水定容至10mL，用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成1mL小份贮存于－20 ℃。
1mol/LmgCl2溶液
【配制方法】
在800mL水中溶解203.4 gmgCl2·6H2O，用水定容至1 L，分装成小份并高压灭菌备用。
【注意】MgCl2极易潮解，应选购小瓶（如100 g）试剂，启用新瓶后勿长期存 放。
β-巯基乙醇（BME）溶液
【配制方法】
一般得到的是14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中保存于4 ℃。
【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。
酚的氯仿溶液
【配制方法】
把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris·HCl（pH7.6）抽提几次以平衡这一混合物，置于棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/L Tris·HCl（pH7.6）液层，保存于4 ℃。
【注意】酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤。
1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液
【配制方法】
将9.82 g乙酸钾溶解于90mL纯水中，用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后加入纯水定容到1 L，保存于－20 ℃。
乙酸钾溶液（用于碱裂解）
【配制方 法】
在60mL 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5mL冰乙酸和28.5mL水，即成钾浓度为3mol/L，而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。
3mol/L乙酸钠（pH5.2和pH7.0）溶液
【配制方法】
在80mL水中溶解408.1 g三水乙酸钠，用冰乙酸调节pH值至5.2或用稀乙酸调节pH值至7.0，加水定容到1 L，分装后高压灭 菌。
5mol/L NaCl溶液
【配制方法】
在800mL水中溶解292.2 g NaCl加水定容至1 L，分装后高压灭菌。
10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液
【配制方法】
在900mL水中溶解100 g电泳级SDS，加热至68 ℃助溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2，加水定容至1 L，分装备用。
【注意】
SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS，10%SDS溶液无须灭菌。
1mol/L Tris溶液
【配制方法】
在800mL水中溶解121.91 g Tris碱，加入浓HCl调节pH值至所需值。
pH HCl
7.4 70mL
7.6 60mL
8.0 42mL
应使溶液冷却至室温后方可最后调定pH值，加水定容至1 L，分装后高压灭菌。
【注意】如1mol/L溶液呈黄色，应重新制备质量更好的Tris。
Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1 ℃，pH值大约降低0.03个单位。例如，0.05mol/L的溶液在5 ℃、25 ℃和37 ℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。
X-gal溶液
【配制方法】
X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/mL的贮存液。保存于玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以免因受光照而被破坏，应贮存于－20 ℃。X-gal溶液不需要过滤除菌。
五、氨基酸的特性
续表
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六、遗传密码
密码子的第二位
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