非特异性酯酶是一组能在酸性、中性或碱性pH条件下，水解各种短链脂肪酸酯或芳香酯的酶，为单核巨噬细胞的标志酶。它分布很广，几乎存在所有血细胞，包括巨核细胞、浆细胞，甚至上皮细胞的溶酶体内。NSE底物较多，如α-萘酚醋酸酯酶（α-naphthol acetate esterase，α-NAE）、萘酚AS醋酸酯酶（naphthol AS acetate esterase，NASAE）、萘酚ASD醋酸酯酶（naphthol ASD acetate esterase，NAS-DAE）、α-萘酚丁酸酯酶（α-naphthyl butyrate esterase，α-NBE）。根据pH不同分为中性、酸性和碱性非特异性酯酶。ICSH推荐非特异性酯酶染色方法为α-丁酸萘酚酯酶染色和醋酸AS-D萘酚盐固蓝BB法。
1.醋酸AS-D萘酚酯酶染色（naphthol ASD acetate esterase，NAS-DAE）
（1）原理:血细胞中的醋酸萘酚酯酶在pH中性条件下，能水解基质液中的醋酸ASD萘酚，产生ASD萘酚，再与重氮盐固兰BB偶联，形成不溶性蓝色沉淀，定位于胞质中。
（2）操作步骤:新鲜涂片用甲醛蒸气固定5min，水洗，晾干。浸入作用液中，室温孵育70min，水冲，晾干。甲基绿复染，水洗，晾干。
氟化钠抑制试验:取20ml作用液，加入30mg氟化钠，混匀。放一张涂片按上述方法染色。镜检时两张标本进行对照，用油镜计数100个被检细胞，分别计算出抑制前和抑制后的阳性率与阳性积分，并按下列公式计算抑制率。抑制率>50%为抑制。
(3）结果判断:阳性结果为胞质中出现蓝色颗粒，细胞核为绿色。
2.α-丁酸萘酚酯酶染色(alpha—naphthyl butyrate esterase，α-NBE)
(1）原理:血细胞中的α-丁酸萘酚酯酶在pH碱性环境下，能将基质液中的α-丁酸萘酚水解产生α-萘酚，再与重氮盐偶联形成不溶性沉淀，定位于胞质内。
(2）操作步骤:新鲜干燥涂片在冷固定剂中固定30s，水洗，晾干。置入基质液室温作用45min，水洗，晾干。2%甲绿溶液复染1～2min，水洗，晾干后镜检。
(3）结果:氟化钠抑制实验操作步骤及计算方法同NAS-DAE染色。阳性结果为胞质中出现棕红色物质。
3.α-萘酚醋酸酯酶（α-Naphthol acetate esterase，α-NAE）
(1）原理:在中性条件下，酯酶将醋酸萘酚水解，产生萘酚，与重氮盐偶联，产生不溶性的有色沉淀。
(2）操作步骤:干燥涂片用甲醛-丙酮缓冲液固定30s，水冲，晾干。置于α-NAE作用液37℃孵育60min，流水洗5min，晾干。2%甲基绿复染20min，水冲，晾干。镜检。
(3）阳性程度参考:（-）胞质内无阳性反应物;（+）胞质内有很弱的阳性反应物，颜色很淡，或阳性物约占胞质面积的1/4;（++）胞质内阳性反应是显而易见的，颜色较深或阳性物约占胞质面积的1/2;（+++）在（++）的基础上，阳性反应物深，但胞质内有空隙或阳性物约占胞质面积的3/4;（++++）在（+++）的基础上，有很强的阳性反应，充满胞质，有时在细胞核上，占胞质面积的4/4。
(4）非特异性酯酶临床意义:①原始单核细胞NAE多呈阳性，阳性物大部分为局灶型，少数呈颗粒型。幼稚单核细胞可呈阴性、弱阳性和强阳性。阳性物颜色鲜艳呈细小颗粒弥散状，加NaF后，阳性率及指数明显降低或为阴性。②原始及早幼粒细胞阴性或弱阳性反应，酶型多为弥散型、局灶型。多颗粒异常早幼粒细胞部分呈强阳性反应，阳性物呈弥散型。中幼粒细胞阴性或中等强度阳性，部分异常中幼粒细胞较强呈团块样反应。③原始和幼稚淋巴细胞α-NAE呈阴性或阳性反应，阳性反应物多为颗粒型或局灶型。部分可被氟化钠抑制。④原始、幼稚巨核细胞α-NAE部分可呈强阳性。表现弥散型和颗粒型。易被NaF抑制，可用α-丁酸萘酚盐实验来区别单核细胞和巨核细胞。⑤网状细胞α-NAE呈较强的阳性反应，阳性物多呈弥散状。浆细胞α-NAE呈强阳性，阳性反应物颗粒粗大或呈珠状。
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