(一)同种异体皮移植术
1.异体皮的选择 主要从新鲜尸体采取,死者生前应无传染病、皮肤病、恶性肿瘤,死后6h内采取为佳,在冬季或尸体保存在冰箱者,死后可延长到12~24h采取。
2.异体皮的采取和制备 将尸体用肥皂水、自来水清洗干净,剃毛,用手术刀分别将四肢及躯干的皮肤连同皮下组织取下(图17-10),浸于0.07%苯扎溴铵(新洁尔灭)溶液中15min后取出,用灭菌生理盐水洗去皮肤上残留的液体,在无菌操作下用鼓式取皮机制成中厚皮片,其厚度0.375mm为宜。也可将尸体清洁剃毛后用1%碘酊、75%乙醇先后消毒,在无菌操作下连同皮下组织取下,再用鼓式取皮机制成中厚皮片备用,死婴常用此方法采取。
图17-10 婴儿异体皮采取切口
用鼓式取皮机制备大张皮片的方法:先调好鼓式取皮机的刻度,使鼓面向上,异体皮表皮侧贴于鼓面,然后助手将皮肤拉紧使其较好地贴于鼓面;术者左手持鼓轴,右手持刀架,视取下皮片的厚度随时调节刻度盘,直到厚度满意为止。若皮下脂肪太厚,可先切取成较厚的皮片,然后再制成所需的0.375mm的中厚皮片。取完一鼓皮后,不要将皮片剪下,换一个位置再取,这样重复更换位置便可制成一大张中厚皮片(图17-11)。近年来有用电动或风动取皮机在尸体上直接采取,此法只能取成条状中厚皮片,可酌情选用。
3.异体皮片的储存 4℃冰箱储存,可将已制备成的中厚皮片,用灭菌生理盐水清洗后浸入庆大霉素溶液中(10U/ml)片刻,取出皮片,将皮片真皮面相对,卷成筒状,用油纱布或灭菌生理盐水纱布包裹,置于消毒的皮盒中,皮盒中留有一定空间,皮盒用胶布封口写上采取和储存时间,5d内皮片活性好,3周内具有一定活力,但存活率低。
图17-11 大张中厚皮片的采取制备
用鼓式取皮机去掉一部分真皮及皮下脂肪,取完一鼓不要剪裁,换一个位置再取,如此不断采取便可获得大张中厚皮片
-80℃冰箱中储存皮片,将制备好的中厚皮片放入抗冻液,在4℃冰箱中预冻30min,然后封存入聚乙烯袋中存入-80℃冰箱中备用。抗冻液由10%二甲基亚砜,10%丙二醇、10%聚乙二醇及kreb磷酸缓冲液配制而成,使用前将盛有皮片的塑料袋从冰箱中取出立即置于40℃恒温流动水浴箱中快速复温(1min)后备用。
-196℃液氮中储存皮片,将制备好的中厚异体皮片按照前述-80℃储存的方法将抗冻剂抗冻后的皮片封存于聚乙烯袋中,直接置入-196℃液氮中储存即可,使用前复温的方法同前述。采用以上三种方法储存的皮片均具有一定的活力,移植后可以成活,其中皮片质量最佳的是4℃储存的皮片,其次是-80℃、-196℃液氮储存的皮片,后两者移植后常出现水疱及广泛的表皮松脱以及真皮夹花状坏死,抗感染能力差,易出现皮片失活坏死,但三者均可起到覆盖创面和对自体皮片生长扩散的桥梁作用,此外低温储存的皮片(-80℃、-196℃)在创面留存的时间短,覆盖在小片自体皮上时(嵌植法)要求自体皮间距<5mm为好,间距过大异体皮过早脱落会出现间隙肉芽创面,影响自体皮生长,或形成片状肉芽创面,影响创面愈合。
其他储存异体皮片的方法:制备好的异体中厚皮片经过冷冻干燥后封存于灭菌塑料袋中,可在室温中保存,也可将异体皮片用0.4%戊二醛溶液浸泡处理,然后冷冻干燥密封而存于灭菌塑料袋备用。此两种方法处理后的皮片均无活性,移植后可贴附于创面,起到暂时封闭创面的作用,还可防止感染,减少创面渗出,但因其具有一定占位性,不利于自体皮片的生长和扩散,其桥梁作用差于具有活性的异体皮片。
(二)异种皮片的选择和制备
常用猪皮,选10~20kg重无皮肤病的小白猪。大猪也可使用,但其皮肤比较硬,随形性差,不如小猪皮柔软好用。先将小猪在麻醉下反复清洗,剃毛,用2.5%碘酊及75%乙醇消毒皮肤,在无菌操作下连同皮下组织取下,用鼓式取皮机制成中厚皮片,将其浸入含有庆大霉素及抗真菌药的溶液中片刻,取出猪皮,真皮面相对,卷成筒状,用油纱布及抗菌纱布包裹,放入消毒皮盒中,于4℃冰箱中储存备用。
猪皮移植后排斥时间早,移植前用地塞米松溶液处理,可减缓其排斥反应,有利于自体皮片生长扩散融合,用于嵌植的自体皮片,其洞距以<0.5cm为宜。
此外,用冷冻干燥及用放射线处理后的猪皮片,已失去活性,只供覆盖保护创面用,作为一般性生物敷料。
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