肿瘤标志物放射免疫测定

利用放射免疫分析、检测血清和体液中的肿瘤标志物，已成为肿瘤早期诊断的重要方法，这种方法不但可以用于肿瘤的普查，而且可以对肿瘤治疗后有无复发及预后等提供有价值的依据。所谓肿瘤标志物，即在肿瘤病人体内可以检出或含量较高，而正常人体缺如或含量较低的活性物质，它包括以下几种：①肿瘤细胞产生的特异性物质，即肿瘤相关抗原，如CA－19－9，CA－50等；②有些肿瘤细胞具有胚胎期的功能，可以分泌出癌胚蛋白，如甲胎蛋白（AFP），癌胚抗原（CEA）等；③虽非肿瘤细胞独特产生的物质，但由于肿瘤细胞生长繁殖加快，而释放增多，如β2－微球蛋白（β2－m）；④有些肿瘤能分泌出分泌激素，或起源于APUD细胞具有异位分泌激素功能，如人绒毛膜促性腺激素（HCG）、降钙素（CT）等；⑤酶，如前列腺酸性磷酸酶（PAP）、神经元特异性稀醇化酶（NSE）等。

这些肿瘤标志物用于肿瘤诊断，单一性较强，如AFP用于测定原发性肝癌或生殖器胚胎性肿瘤，NSE用于检测小细胞肺癌，PAP用于检测前列腺癌，CT用于检测甲状腺髓样癌；HCG用于检测绒毛膜细胞癌或恶性葡萄胎；甲状腺球蛋白（TG）检测甲状腺癌复发等。而有些则专一性较差，多种肿瘤均可显示一定的阳性率，如CEA，CA－19－9，CA－50，CA－125，CA－242用于消化道肿瘤，胰腺癌、肺癌、卵巢癌等恶性肿瘤，β2－m，用于淋巴瘤、肝癌等肿瘤。

1．AFP 甲胎蛋白是胎儿细胞合成的一种糖蛋白，其中少部分也可在胎儿卵黄囊细胞，胃肠道细胞或肺、胰、肾细胞合成，然后释放于血液循环中，当出生后1～2周，随着胚肝细胞造血功能停止，AFP合成也即停止，故血中AFP迅速下降，至出生3个月降至正常水平，原发性肝癌细胞由于返祖及基因去抑制作用，重新合成AFP。在肝癌细胞中AFP的合成发生于细胞增殖的G1期末至S期，于M期后10h开始释放入血。

正常人血清AFP＜250ng／ml，血清AFP＞400ng／ml，一般可以诊断原发性肝癌，但必须排除妊娠期妇女及活动期肝病。

生殖器胚胎性肿瘤，如卵巢胚胎癌，睾丸胚胎癌，腹膜后恶性畸胎瘤、AFP值可明显升高，对诊断、治疗和预后评价等均有意义。

2．CEA 癌胚抗原是一种糖蛋白，在3～6个月的胎儿消化道可以检出。Gold于1965年首先从人结肠癌组织和胎儿肠组织中提取到CEA。CEA不仅存在于癌细胞内，并可以向血液中释放，故从血液中及其他体液中检测出来。CEA放射免疫分析对诊断某些肿瘤特别是消化道肿瘤有帮助。尤其对疗效观察，复发检测及预后判断有重要意义。

在测定CEA时，由于对血标本的处理不同，测得健康人的正常值可有很大不同，如将血标本用提取法预先清除血中α2巨球蛋白和IgM等对反应的干扰，则正常值较低（＜5ng／ml）；如血标本不加处理直接测定，则正常值较高（15～20ng／ml）。恶性肿瘤病人，血清CEA测定有较高的阳性率，其中结直肠癌阳性率约为70%～85%，肺癌为50%～65%，胃癌和食管癌为35%～45%。血清CEA的检测对疗效观察，有无复发及转移很有帮助。结肠癌肝转移的病人，血中CEA往往有很高的浓度。手术切除肿瘤或化疗或两者结合，如CEA由阳性转为阴性则表示预后良好，如继续保持高浓度则预后不佳，若阳转后又升高，则表明肿瘤复发或转移。分化良好的甲状腺癌CEA阳性往往较高。

由于CEA分子具有多个抗原决定簇，除恶性癌瘤的特异性抗原决定簇外，尚有非特异性交叉反应性抗原，故可引导起假阳性结果。一些内脏炎症，如肝炎等，有时也会出现CEA增高。

3．CA－19－9，CA－50，CA－72－4，CA－125，CA－242 这类抗原是一种在各种上皮类恶性肿瘤中常常出现升高的糖类抗原，可以从各种不同组织的原发或转移癌中分离出来，而正常成熟组织中则不存在。因此这类抗原是一种普遍的肿瘤相关物质，而不是特属于某一器官。

正常细胞表面糖类一般与糖脂和糖蛋白交联成复合物，细胞膜的这些物质在细胞的信息传递、生长和分化中起不同作用、细胞癌变后由于糖基转化酶的失活，或某些胚胎期活跃而成熟期又静止的一转化酶被激活，造成细胞表面糖类的变化，CA－19－9，CA－50等抗原的出现可认为是上述变化的结果。这类抗原是一种以唾液酸糖脂和唾液酸糖蛋白为主要成分的糖类抗原，它们同属于糖类抗原一类。

CA－19－9的正常值＜37U／ml，对结肠癌的阳性率为39%，肝癌为49%，胰腺癌为79%，肺癌为12%。

CA－50的正常值为（6．05＋4．93）U／ml，对结肠癌及食管癌的阳性率为62%，原发性肝癌为79%，肺癌为50%，卵巢和子宫癌为65%，其他恶性肿瘤为50%。

CA－74－4的正常值＜4U／ml，对结肠癌的阳性率为44%（B期30%，C期22%，D1期50%，D2期57%，局部复发39%，远处转移52%）。胃癌为46%，卵巢癌30%，胰腺癌17%。

CA－125的正常值＜65U／ml，对卵巢癌的阳性率较高为92%，对卵巢转移癌阳性率为80%，但对卵巢良性囊肿的假阳性率也达到37%。

CA－242的正常值＜12U／ml，对胰腺癌的阳性率为86%，结、直肠癌为62%，肝癌为44%，胃癌为34%，其他恶性肿瘤为51%。

4．绒毛膜促性腺激素（HCG，β－HCG）HCG为人体胎盘滋养层细胞分泌的促性腺激素，为一种糖蛋白，HCG分子有2个非共价键结合的单位，分别称为α和β亚单位，α亚单位与其他糖蛋白类激素如促黄体激素（LH），促卵泡激素（FSH），促甲状腺激素（TSH）等的α亚单位一级结构相似，但β亚单位则各异，故测定β－HCG较之测定HCG更具有特异性。

β－HCG正常值＜3ng／ml，滋养层细胞肿瘤可有显著增高，甚至高达＞1 000ng／ml。其他起源于APUD细胞的肿瘤如小细胞肺癌、类癌等，β－HCG也可有一定的阳性率。

5．降钙素（CT） 是由甲状腺滤泡旁细胞（C细胞）分泌的多肽激素，有32个氨基酸组成，相对分子质量约为3 000，人、猪、牛、羊的降钙素分子内部的氨基酸排列顺序各不相同，致免疫活性也不同。建立降钙素的放射免疫分析必须使用人降钙素作为免疫源。

正常人血清CT值在500pg／ml范围，甲状腺髓样癌病人血清中可高达＞1 000pg／ml，小细胞肺癌也可达到1 000pg／ml。

6．酸性磷酸酶（PAP） 酸性磷酸酶是具有多样性的细胞酶，它存在于多种脏器中，如肝、肾、骨骼、脾、前列腺、红细胞、白细胞等。而PAP是其中的一种，它是由成熟的前列腺上皮细胞合成。酸性磷酸酶的生化活性受温度、时间、pH等因素影响很大，故原始的生化测定法，其特异性及敏感度均差。但PAP的免疫反应十分稳定，不受温度与时间影响，而且利用它制备的抗体也不与其他组织中的酸性磷酸酶反应，所用放射免疫法测定PAP，明显提高了测定的敏感度和特异性。

PAP的正常值＜4ng／ml，主要用于诊断前列腺癌，特别是伴有骨转移者，80%病人显示升高，而其他肿瘤的骨转移者则无升高。经检查还可以对前列腺癌病人的治疗进行观察，追踪监测。

7．前列腺特异性抗原（PSA） PSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的糖蛋白，相对分子质量（33～34）×103，由234个氨基酸组成，女性血清中无PSA。

血清PSA浓度是普查早期发现和监测前列腺癌的指标之一，具有高度的敏感性和特异性，血清中PSA升高与前列腺癌分期、分级呈正相关，与疗效呈负相关。肿瘤复发与恶化时，PSA动态升高，曾做过前列腺按摩或活检查，可引起血清PSA暂时升高，并持续＞48h，另外前列腺炎及前列腺肥大血清PSA也可有一定程度的升高。

PSA的正常值＜5ng／ml，在＞55岁男性正常人群中，超过此值者仅有5%，＜10ng／ml时超过此值者为0。

8．神经元特异性烯醇化酶（NSE）NSE是一种糖原酵解——烯醇化酶中由γ亚基组成，相对分子质量为90×103的二聚体酸性同工酶。它特异性地定位于神经元和神经内分泌APUD细胞系。肿瘤分子生物学研究揭示，小细胞肺癌时，显示出这类神经内分泌细胞的生物学特性，有过量的NSE表达。

NSE的正常值为（9．2＋5．0）ng／ml。如将均值9．2ng／ml＋3SD，即正常值上限定为25ng／ml，则对小细胞肺癌的阳性检出率为83．8%，特异性为92．1%几乎可以全部排除其他非小细胞肺癌疾患。可见血清NSE的检测对小细胞肺癌的诊断和鉴别诊断有高度的特异性和敏感性。

小细胞肺癌的肿瘤负荷与NSE水平呈明显的相关性。经化疗及放疗后肿瘤缩小的病人，血中NSE水平呈明显下降，若在治疗过程中NSE不见降低，则提示治疗反应不佳。这有助于临床医师对治疗反应做出判断。小细胞肺癌复发时，NSE会再次升高，一般来说，NSE升高要比临床上确定复发提早4～12周。

9．甲状腺球蛋白（TG） 是由甲状腺所合成的大分子蛋白质，其主要作用与甲状腺激素的合成有关，同时也能使腺体中贮存相当量的甲状激素供分泌所需。自20世纪70年代后，证实有微量TG存在于正常人外周血液中，在某些甲状腺疾病时可以升高，血清中TG的放射免疫测定是诊断分化型甲状腺癌手术后复发和转移的重要方法。由于甲状腺组织是外周血中TG的惟一来源，因此当甲状腺全切除后，一般来说外周血中即不再能检测出TG。由于分化型甲状腺癌具有甲状腺组织特性，能合成和分泌TG，故当复发和转移时，血中又可出现TG，并有不同程度的升高。

TG正常值＜20ng／ml，Lland认为TG＜20ng／ml表明无甲状腺癌存在，20～60ng／ml提示手术后有残留癌组织存在，760ng／ml则提示甲状腺癌在活动。血清TG值强弱依赖于TSH刺激，故在检测TG前应先停用甲状腺制剂（甲状腺片）2～4周。三碘甲状腺原氨酸（T3）的生物半衰期明显短于甲状腺制剂（主要含甲状腺激素T4）对于使用甲状腺激素片作替代疗法的病人，可先由T3代替甲状腺激素片，然后停用T3，2周后再检测血清TG，其敏感性更佳。

10．β2微球蛋白（β2－m） β2－m是一种分子量小，因电泳示在β2球蛋白区带而得名。它是由100个氨基肽键组成，无糖，相对分子质量11．8×103，β2－m是人体组织相容性抗原（HLA）的组成部分，HLA分子是由一个β轻链（即β2－m）和一个α重链组成，α链具有同种异型决定簇，从而决定HLA的特异性，而β链（β2－m）则无同种异型，也无β2－m的同种抗体。人体除红细胞及滋养体细胞外，几乎所有细胞均能合成β2－m并附于细胞表面，正常人β2－m的产生相当恒定，肿瘤细胞及淋巴细胞产生β2－m的能力很高，是体内β2－m的主要合成场所。实验表明，β2－m的合成速度约为24h内0～200ng／106细胞，结合细胞膜上的β2－m与HLA重链，其产生率是一致的，但β2－m可与HLA重链分离，以游离形式释放于细胞外介质中。

正常人血清β2－m值＜2．8ng／ml，淋巴瘤、骨髓瘤及多种实体瘤血清β2－m多呈现增高，阳性率在45%～80%之间，其中淋巴瘤及骨髓瘤分别为81．8%及80%。实体瘤中肺癌，原发性肝癌阳性率为75%，结肠癌，胃癌为62%。由于血清β2－m升高与肿瘤细胞量有关，故可用以评估淋巴瘤等肿瘤的分期，治疗反应及预后。

11．铁蛋白（ferritin） 铁蛋白是机体内一种棕色的含铁蛋白质复合物，广泛分布于机体内，在肝、脾、骨髓内含铁量最高，仅肝脏内的含量就占体内的1／3，某些肿瘤细胞也可合成并释放铁蛋白，致使血清中铁蛋白升高。

正常人血清铁蛋白含量，其正常范围较广，性别差异较大，男性高于女性，年龄亦有差异，成年人正常值，男性20～240ng／ml，女性16～132ng／ml，一般认为血清铁蛋白＜28ng／ml者为正常，原发性肝癌及急性白血病病人血清铁蛋白多明显增高，其他肿瘤基本在正常范围内。