（一）Gomori硫化铅染色法
【原理】 酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）在酸性环境下（pH 5）能将β-甘油磷酸钠水解，产生磷酸钠，进而与硝酸铅作用生成白色磷酸铅沉淀，定位于酶活性处。然后再与硫酸铵作用，生成棕黑色的硫化铅沉淀，定位于胞质中。
【试剂】
1.温育液蒸馏水74ml，5%硝酸铅2ml，3.2%β-甘油磷酸钠4ml，0.05mol/L醋酸缓冲液（pH4.7）12ml，上述诸液混匀（pH4.0～5.8）。
2.2%硫酸铵溶液。
3.1%醋酸溶液（须新鲜配制）。
4.甲醛。
5.1%苏木精溶液或0.2%核固红水溶液。
【操作方法】
1.将新鲜干燥涂片置于甲醛蒸气中熏蒸10min，流水冲洗5min，晾干。
2.把已固定的标本放入温育液中，在37℃水浴箱作用2～4h，流水冲洗5min，晾干。
3.置于2%硫酸铵溶液中5min，流水冲洗5min，晾干。
4.放入1%苏木精溶液染lmin或0.2%核固红水溶液5min后水冲洗，晾干后镜检。
【结果】 阳性反应为胞质内出现棕黑色颗粒或黑色片状沉淀。
（二）偶氮偶联染色法
【原理】 酸性磷酸酶（ACP）在酸性环境中能将磷酸萘酚AS-BI水解，产生萘酚AS-BI，继而与重氮盐偶联，产生不溶性红色沉淀，定位于胞质内。
【试剂】
1.甲液 4%副品红（2mol/L盐酸溶解）溶液0.5ml，4%亚硝酸钠0.5ml，0.1mol/L醋酸钠9ml，混合，用2mol/L氢氧化钠调节pH值至5.0。
2.乙液 萘酚AS-BI磷酸钠5mg、丙酮0.2ml、醋酸缓冲液（pH5.0）10ml，混匀，溶解。
3.基质液 甲液10ml＋乙液10ml，混合。
4.甲醛
5.其他 1%苏木精溶液或0.2%核固红水溶液。
【操作方法】
1.新鲜干燥涂片置于甲醛蒸气中熏蒸7～20min，流水冲洗5min，晾干。
2.涂片置于温育液，在37℃水浴箱中作用1h后流水冲洗5min，晾干。
3.再放入1%苏木精溶液中复染2min或0.2%核固红水溶液复染5min后，流水冲洗，晾干后镜检。
【结果】 阳性反应为胞质中出现鲜红色颗粒沉淀。
（三）抗酒石酸酸性磷酸酶染色
用相同方法制备两份温育液，其中一份加入L-酒石酸150mg。取相同的标本两张，分别按上述步骤操作。当血细胞内酸性磷酸酶不被L-酒石酸抑制的，两份结果均呈阳性反应；如果被L-酒石酸抑制的，温育液中不加L-酒石酸的呈阳性反应，而加L-酒石酸的则呈阴性反应。
【临床意义】
1.帮助诊断多毛细胞性白血病 多毛细胞呈强阳性或中度阳性反应，且不被L-酒石酸所抑制；淋巴肉瘤细胞和慢淋的淋巴细胞也可呈阳性反应，但可被L-酒石酸抑制。
2.有助于鉴别T淋巴细胞和B淋巴细胞 前者呈阳性反应，为颗粒粗大、密集、局限性块状阳性反应；后者呈阴性反应或颗粒细小而稀疏的弱阳性反应。
3.戈谢细胞 ACP为强阳性反应；尼曼-皮克细胞呈阴性或弱阳性反应，可帮助两者的鉴别。
4.其他 浆细胞呈阳性反应，幼红细胞、巨核细胞系统、血小板呈阴性反应。
【注意事项】
1.标本应为新鲜的骨髓涂片和血涂片。
2.标本应用甲醛熏蒸。
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