酸性非特异性酯酶染色

【原理】　血细胞中的α-醋酸萘酚酯酶（acidα-naphythyol acetate esterase，ANAE）在pH酸性条件下能水解基质液中α-醋酸萘酚，产生α-萘酚，再与六偶氮副品红偶联形成不溶性暗红色沉淀，定位于胞质内所在酶活性处。

【试剂】

1.固定液 40%甲醛溶液。

2.六偶氮副品红溶液 将2mol/L盐酸配制的4%副品红溶液3ml与4%亚硝酸钠溶液3ml新鲜配制混合。

3.α-醋酸萘酚溶液 0.05gα-醋酸萘酚溶于50%丙酮2.5ml。

4.温育液 将六偶氮副品红溶液3ml加入0.067mol/L磷酸缓冲液（pH7.6）44.5ml中，再慢慢滴加α-醋酸萘酚溶液1.25～2.5ml要充分混匀，并用1mol/L氢氧化钠调节pH值至6.0，过滤备用。

5.复染液 2%甲绿溶液。

【操作方法】

1.新鲜干燥涂片标本用甲醛蒸气固定10min，流水冲洗，晾干。

2.置于温育液37℃水浴箱中作用1h，流水冲洗，晾干。

3.2%甲绿溶液复染5min，流水冲洗，干后镜检。

【结果】

1.阳性反应 棕红色或暗红色颗粒，或弥散样红色小点，定位于胞质中。

2.酸性非特异性酯酶（ANAE） 主要分布在T淋巴细胞和单核细胞内；粒细胞、B淋巴细胞、红系细胞、巨核细胞和血小板中含量较少。

【临床意义】

1.有助于区分T淋巴细胞和B淋巴细胞 ANAE染色在T淋巴细胞胞质中呈现点状颗粒或大块状局限阳性反应；B淋巴细胞大多数为阴性反应，偶见稀疏弥散细小颗粒。

2.鉴别急性白血病类型 急性淋巴细胞白血病（T淋巴细胞型）为点状或块状阳性，局限分布；急性粒细胞白血病ANAE染色大部分呈阴性或弱阳性反应，早幼粒细胞白血病阳性反应较强，呈弥散性分布；急性单核细胞白血病呈强阳性反应，胞质为均匀一致的弥散样淡红或深红色，无点状颗粒。