【摘要】：细胞培养需要清洁、稳定的工作环境。造血祖细胞体外培养时较为常用的支持物主要有半固体琼脂和甲基纤维素。半固体琼脂用于培养粒系造血祖细胞的效果较好，甲基纤维素主要起支架作用，常用于培养红系、巨核系及混合系集落。血清的质量是造血祖细胞培养成功的关键。造血祖细胞增殖分化时，必须要有细胞因子的参与，体外造血祖细胞培养可应用细胞或组织条件培养液，也可在培养体系中直接加入细胞因子。
（一）实验室
细胞培养需要清洁、稳定的工作环境。实验室要有超净工作台、CO2恒温培养箱、干燥箱、倒置光显微镜、冰箱、离心机、天平及一次性消毒塑料器皿等。
（二）培养液
培养液是培养细胞所必需的营养物质。常用的细胞培养液有：RPMI l640、DMEM、IMDM等，这些营养液主要为造血祖细胞生长提供所需的氨基酸、糖、脂、维生素及无机盐等。
（三）培养的支持物
造血祖细胞体外培养时较为常用的支持物主要有半固体琼脂和甲基纤维素。半固体琼脂用于培养粒系造血祖细胞的效果较好，甲基纤维素主要起支架作用，常用于培养红系、巨核系及混合系集落。
（四）血清
血清中含有丰富的营养物质，包括大分子蛋白质及核酸，对细胞生长繁殖、黏附以及中和毒性物质起着重要的作用。血清的质量是造血祖细胞培养成功的关键。常用的血清有小牛血清、胎牛血清、人血清等，需要注意的是这些血清的批号及生产日期的差异会对造血细胞的培养产生显著的影响。
（五）细胞因子
造血祖细胞增殖分化时，必须要有细胞因子的参与，体外造血祖细胞培养可应用细胞或组织条件培养液，也可在培养体系中直接加入细胞因子。根据培养细胞的种类不同，所选择的细胞因子也各有不同。
（六）抗生素
培养液中加入抗生素，可防止无菌操作过程中可能发生的细菌污染。常用的抗生素有青霉素（0.1g/L）、链霉素（0.08g/L）等。
（七）pH值调整液
pH值是细胞培养的关键因素之一。一般用7%NaHCO3溶液来调整培养液的pH值。
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