血清铁蛋白检测

【原理】　吸附在固相载体的抗铁蛋白抗体与血清中的铁蛋白结合，形成铁蛋白-抗铁蛋白抗体复合物，再与酶标记的铁蛋白抗体作用，复合物中的辣根过氧化物酶催化H2O2产生新生态氧，后者作用于邻苯二胺，产生有色物质，与标准铁蛋白比较，可求得血清中铁蛋白含量。

【试剂】

1.生理盐水

2.洗涤液 0.05mol/L pH 7.2PBS，0.05%的聚山梨酯（土温-20）。

3.稀释液 含5%血清白蛋白的洗涤液。

4.底物溶液 取0.1mol/L磷酸氢二钠5.14ml，加0.05mol/L枸橼酸钠4.86ml和联苯二胺4mg混匀溶解，临用前加3%H2O20.05ml。

【操作方法】　取96孔反应板，测定、标准和空白各孔均加100μl抗铁蛋白血清，放置4℃冰箱过夜包被抗体，用洗涤液洗3次，每次放室温3min。标准和测定孔内分别加100μl系列铁蛋白标准液和样品（用稀释液稀释10倍），置37℃50min。各孔用生理盐水洗3次，洗法同上。各孔加100μl的酶标记抗体，37℃水浴50min，再用生理盐水洗3次。每孔加100μl底物溶液，置37℃30min，显色。每孔加2mol/L硫酸50μl终止反应，用酶标仪492nm波长比色，读取各孔吸光度。

用系列铁蛋白标准孔吸光度和相应浓度制备标准曲线。根据样品吸光度在标准曲线上求得相应铁蛋白含量，再乘以样品稀释倍数即得出样品中铁蛋白的含量。

【参考值】　男性：20～250μg/L；女性：10～120μg/L。

【临床意义】　血清铁蛋白是体内铁的储存形式之一。血清铁蛋白降低是诊断早期缺铁性贫血（隐性缺铁）的主要指标，血清铁蛋白升高可见于免疫系统疾病、肿瘤、血色病、频繁输血、肝病、急性感染等。