【摘要】:同时以标准液制备标准曲线即可计算出待测血清Tf的浓度。配制3%琼脂PBS,置56℃备用,用PBS按抗血清效价1/2稀释抗血清,置56℃备用,2ml抗血清加2ml琼脂混合,加于水平放置的塑料盒或载玻片上,打3mm孔,用PBS10倍稀释待测血清,向小孔各加入系列标准及待测血清10μl,静置数分钟,37℃24h,测量沉淀环直径。
【原理】 检验转铁蛋白是根据免疫扩散法的原理,将血清按一定效价与溶化的琼脂混合制成含抗血清的琼脂凝胶,打孔,加入待测血清,孵育后,可见白色沉淀环,沉淀环大小与浓度相关。同时以标准液制备标准曲线即可计算出待测血清Tf的浓度。
【试剂】
1.抗转铁蛋白血清、转铁蛋白参考血清。
2.0.01mol/L pH 7.4PBS、琼脂。
【操作方法】
1.用PBS稀释参考血清,使浓度为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5g/L。配制3%琼脂PBS,置56℃备用,用PBS按抗血清效价1/2稀释抗血清,置56℃备用,2ml抗血清加2ml琼脂混合,加于水平放置的塑料盒或载玻片上,打3mm孔,用PBS10倍稀释待测血清,向小孔各加入系列标准及待测血清10μl,静置数分钟,37℃24h,测量沉淀环直径(精确到0.2mm)。
2.计算用5个浓度标准液对相应沉淀环直径在坐标纸上作图,得标准曲线,一般呈抛物线形。从标准曲线上查出待测稀释血清浓度,乘以10得原血清浓度。
【参考值】 血清转铁蛋白正常2~4g/L。
【临床意义】 血清转铁蛋白增高见于缺铁性贫血。减低见于急性白血病、慢性肝炎、肝癌和肾病等。
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