【原理】 正常红细胞为双凹圆盘形,在低渗盐水中水分通过细胞膜进入细胞内,使之膨胀破坏而溶血。红细胞对低渗盐水的抵抗力与其表面积和体积的比值有关,比值越大,则抵抗力越大,脆性越小;反之则抵抗力越小,脆性越大。正常红细胞吸水膨胀的适应性大(可增加70%的体积而不破裂)。球形等异形红细胞的表面积与容积比(s/v)减小,对低渗盐水的适应性小(脆性增大)。本试验是测定红细胞在一系列不同浓度的低渗盐水内开始溶血和完全溶血的氯化钠浓度。
【试剂】 10g/L NaCl溶液 精确称取经烤干后在干燥器中冷却后的NaCl 1g,溶于100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度。
【操作方法】
1.取14支小试管列于试管架上。按表7-5加入试剂并混匀。静脉采血1ml,在第一排试管中每管加入全血1滴,轻轻摇匀;以同样方法抽取正常人血加入另一排试管中作为对照。
表7-5 红细胞渗透脆性试验操作方法
2.室温静置2h后观察结果。先从高浓度盐水管开始观察,上层溶液初现透明红色者为开始溶血管,溶液透明呈深红色、管底红细胞完全消失者为完全溶血管(如不易判断可低速离心1min后观察有无红细胞沉淀)。记录其各自氯化钠浓度。
【参考值】
(1)开始溶血:4.4~4.8g/L(75.2~82.1mmol/L)NaCl溶液。
(2)完全溶血:2.8~3.2g/L(47.9~54.7mmol/L)NaCl溶液。
【临床意义】 患者比正常对照高0.4g/L(或6.8mmol/L)即有诊断价值。脆性增高:见于遗传性球形红细胞增多症、椭圆形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多症和遗传性口形红细胞增多症的部分病例。脆性减低:见于缺铁性贫血、地中海贫血、脾切除术后和阻塞性黄疸。
【注意事项】
1.每次检查均应有正常对照。
2.氯化钠必须干燥后准确称量,用前新配。
3.血液标本应直接滴入液体中,避免沿管壁流下,血液与氯化钠溶液之比约1:25。血液标本不能用枸橼酸盐、草酸盐和EDTA盐抗凝的标本,以免增加离子强度,改变溶液渗透压。如用上述抗凝血标本,则先用等渗盐水洗涤一次后,配成50%的红细胞悬液进行检查,当病人有明显黄疸时亦按此法处理血标本。
4.结果不易判断时可离心沉淀后观察。
5.所用器材均应洁净干燥。
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