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缺陷变性珠蛋白小体试验

时间:2024-06-30 百科知识 版权反馈
【摘要】:用甲紫染色观察红细胞中含变性珠蛋白小体的情况。变性珠蛋白小体为圆形或多角形,大小不一,染色呈紫黑色或蓝紫色颗粒,散在于红细胞中。吸取悬液一滴置于玻片上,加盖玻片油镜计数1 000个红细胞,计算含5个以上变性珠蛋白小体的红细胞所占的百分率。

【原理】 G6PD缺乏的病人血中加入乙酰苯肼,37℃孵育2~4h,乙酰苯肼可使血红蛋白氧化成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白解离成高铁血红素和变性珠蛋白,变性珠蛋白聚合成变性珠蛋白小体,附着于红细胞膜上。用甲紫染色观察红细胞中含变性珠蛋白小体的情况。变性珠蛋白小体为圆形或多角形,大小不一,染色呈紫黑色或蓝紫色颗粒,散在于红细胞中。

试剂

1.1g/L乙酰苯肼溶液 乙酰苯肼2ml加pH 7.4PBS缓冲液2ml。

2.10g/L甲紫盐水溶液 甲紫(结晶紫)1g,7.3g/L NaCl加至100ml。

【操作方法】 取肝素抗凝血0.1ml加入2ml乙酰苯肼溶液,混匀,37℃水浴中孵育4h。取0.5ml孵育后的红细胞混悬液加0.5ml 10g/L甲紫盐水溶液,混匀染10min。吸取悬液一滴置于玻片上,加盖玻片油镜计数1 000个红细胞,计算含5个以上变性珠蛋白小体的红细胞所占的百分率。

【参考值】 健康人红细胞含变性珠蛋白小体<30%。

【临床意义】 G6PD缺乏症5个及5个以上珠蛋白小体的红细胞数常>45%,含有不稳定血红蛋白,血红蛋白分子结构发生改变,稳定性减低易被氧化,患者阳性细胞多>30%,还原型谷胱甘肽缺乏症患者阳性细胞也增加。

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