【原理】 用稀醋酸溶液将血液稀释一定倍数并破坏红细胞,滴入计数盘中,在显微镜下计数一定范围内的白细胞,经换算即可求出每升血液中白细胞的总数。
【试剂和器材】
1.白细胞稀释液冰醋酸1ml加10g/L亚甲蓝(或甲紫)数滴,再加蒸馏水至100ml。
2.微量采血管通常在采血管上有10μl和20μl两个刻度。
3.小试管1个,滴管或细玻璃棒1支。
4.血细胞计数盘。
【操作方法】
1.取小试管1支,加入白细胞稀释液0.38ml。
2.用75%乙醇消毒皮肤后,穿刺皮肤,弃去第一滴血,再用微量吸管吸血20μl。
3.擦去管外余血,将血液加入已有白细胞稀释液的小试管中,混匀。
4.用滴管或细玻璃棒取混匀血液1滴,滴入计数盘中,静置2~3min,使血细胞下沉。
5.用低倍镜计数四角的四大方格中白细胞总数。
计算:
白细胞数/L=(四大方格内白细胞总数/4)×10×106×20
=(四大方格内白细胞总数×109)/20
【正常参考值】 成人:(4.0~10.0)×109/L;新生儿:(15.0~20.0)×109/L。
【临床意义】
1.增高
(1)生理性:见于妊娠、分娩(产后4~5d恢复正常)、剧烈运动、体力劳动及酗酒后。
(2)病理性:见于急性感染和炎症,如化脓扁桃体炎、肺炎、阑尾炎、败血症等;也可见于手术后、尿毒症、酸中毒、灼伤、白血病等。
2.减少
(1)感染,如伤寒、流感、疟疾、病毒性肝炎。
(2)血液病,如再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症、急性白血病、骨髓增生异常综合征。
(3)长期接触放射线。
(4)长期应用某些化学药物,如氯霉素、合霉素、抗癌药物。
(5)其他,如肝硬化、脾功能亢进和系统性红斑狼疮等。
【注意事项】
(1)白细胞稀释液无法破坏有核红细胞。某些病理情况下(如溶血时),外周血中出现大量幼稚红细胞,可使白细胞计数结果偏高,应予扣除。校正方法如下:
白细胞/L=A×100/(100+B)
式中:A——校正前白细胞/L。
B——在血涂片上分类计数100个白细胞时遇到的有核红细胞数。
(2)取血部位不当,局部冻疮、水肿、发绀、炎症均可影响结果。
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