（一）白色念珠菌法
【原理】 白细胞与白色念珠菌共同温育后加入亚甲蓝染液作活体染色，可观察到白细胞对念珠菌的吞噬情况。念珠菌如被染成蓝色，说明已被杀死，而活菌对染料排斥。
【试剂】
1.白细胞悬液 制备方法同趋化功能测定。用含10%新鲜人AB型混合血清的199或RPMI 1640培养基制成每油镜视野3～4个细胞。
2.白色念珠菌悬液 从血平板培养基上取新生长白色念珠菌菌落1个，混悬于0.5ml生理盐水中，浓度约为6×106/ml（为精确配制，可用血细胞计数板计数的方法定量）。
3.亚甲蓝染液 亚甲蓝20mg溶于10g/L碳酸钠水溶液中，滤纸过滤后使用。
【操作方法】
1.取白细胞悬液0.5ml加白念珠菌0.5ml，充分混匀后将试管加塞，37℃温育45min。
2.2 000r/min离心10min，弃上清（保留少许）。
3.混匀沉淀后滴片，加亚甲蓝溶液1滴混匀。加盖玻片，5min后油镜检查。
4.结果判断计数100个中性粒细胞中吞噬有白色念珠菌的细胞数，即为吞噬率；100个中性粒细胞中吞噬有染成蓝色白色念珠菌的细胞数即为杀菌率。
【正常参考值】
吞噬率（n＝50）：91.04±5.77%。
杀菌率（n＝50）：32.72±7.83%。
最好根据实验室条件，自行调查。
【注意事项】 为使结果有可比性和可重复性，白细胞浓度、菌液浓度、反应时间和条件应标准化。
（二）葡萄球菌法
【原理】 此法提高了吞噬系统中细菌/细胞比例，从而缩短了吞噬反应的时间。通过计算吞噬初速度来反映吞噬细胞的吞噬活性。
【试剂】
1.0.5%甘油。
2.45g/L NaCl。
3.葡萄球菌菌液将生长于普通营养琼脂上的金黄色（或表皮）葡萄球菌于生理盐水中混匀，沸水浴20min后，离心洗涤两次，用标准比浊管参比，配成5×108菌体/ml。
【操作方法】
1.取末梢血40μl，注入含25U/ml肝素的生理盐水20μl中，混匀，37℃水浴1min。
2.注入葡萄球菌菌液40μ1，温育振荡5min。
3.加0.5%甘油2ml，8.5s后加45g/L NaCl 0.5ml混匀。
4.500r/min离心10min。倾去上清，用滴管吸除红细胞层。
5.取沉淀物涂片，Wright染液染色，油镜观察100个中性粒细胞，吞有细菌的细胞数所占百分比为吞噬率；计算被吞噬细菌总数，每个细胞平均吞噬细菌数为吞噬指数，每个细胞每分钟吞噬细菌数为噬菌速度。噬菌速度计算法为：吞噬指数/5min。
【正常参考值】 吞噬率99.4%；吞噬指数20～30；噬菌速度5.1±1.5个/min。
【临床意义】 吞噬与杀菌功能缺陷，常见于慢性肉芽肿、膜糖蛋白缺陷症、G 6PD高度缺陷症、肌动蛋白功能不全症、Chediak-Higashi综合征等。对白色念珠菌的吞噬与杀菌缺陷，也见于严重的白色念珠菌感染与恶性肿瘤患者。
【注意事项】 同白色念珠菌法。
（大连医科大学 孙国珍）
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