一期止血缺陷的筛选检验

一期止血缺陷是指血管壁和血小板异常所引起的止血功能缺陷。包括毛细血管脆性试验、出血时间、血小板计数和血块收缩试验。其中毛细血管脆性试验为临床试验，其诊断的灵敏度、特异性又十分有限，实际很少应用；另外血块收缩试验虽能反映血小板的功能和数量，但对于轻、中度的出血性疾病价值甚低。在此重点介绍血小板计数和出血时间的测定。

（一）血小板计数

【原理】　采用溶解红细胞的血小板稀释液，在显微镜下，计数细胞计数盘内的血小板，通过换算，即可获得标本中单位体积内血小板数。

【试剂和器材】

1.血小板稀释液（草酸铵稀释液）：草酸铵1g，加蒸馏水至100ml，过滤后4℃保存。

2.细胞计数盘。

3.显微镜。

【操作方法】

1.取静脉血20μ1，加入稀释液380μ1中，混匀。待红细胞溶解后滴入计数盘，待血小板沉下后进行计数。

2.计数5个中方格内血小板，将测得的数以×109/L来表示。

计算公式：

血小板数/L＝（五大方格内血小板总数/5）×10×106×20

　　　　　＝（五大方格内血小板总数×109）/20

【参考值】　（100～300）×109/L。

【临床意义】

1.在临床上，除创伤之外，血小板减少是引起出血常见原因。血小板数大于100×109/L，无异常出血；当小于50×109/L时，可有出血症状。常见的疾病有：①血小板生成障碍，如急性白血病。②血小板破坏过多，如ITP。③血小板消耗增多，如DIC、血栓性血小板减少紫癜。

2.血小板增多（血小板数大于400×109/L）①骨髓增生性疾病：慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症，原发性血小板增多症。②急性大出血，急性化脓性感染。③脾切除手术后。

（二）出血时间测定

【原理】　出血时间（bleeding time，BT）采用出血时间测定器测定法，是目前最常用的出血时间测定方法。用出血时间测定器在前臂皮肤上造成一个标准创口，记录出血自然停止所需时间。此过程反映了皮肤毛细血管与血小板相互作用，包括血小板黏附、激活、释放和聚集等反应。

【器材】

1.血压计、消毒乙醇。

2.出血时间测定器，弹簧刀片长6mm，深1mm。

3.消毒滤纸、外科用胶带。

4.秒表。

【操作方法】

1.血压计袖带缚于上臂，加压维持成人5.3kPa，儿童为2.6kPa水平。

2.在肘窝凹下5㎝（相当于两横指）处用乙醇常规消毒，待干。轻轻绷紧皮肤，放置出血时间测定器，使之贴于皮肤表面，揿压按钮，使刀片由测定器内刺入皮肤，同时启动秒表。

3.每隔30s用消毒滤纸吸取流出血液，直到出血自然停止，按停秒表并计时。

4.去除血压计袖带，清洁该区皮肤。伤口处覆一外科用胶带。

【参考值】　6.9±2.1min。

【临床意义】　BT测定是体内的筛选试验。传统方法有Duke法和IVy法，目前推荐使用标准化出血时间测定器法（template bleeding time，TBT）。该方法重复性比传统方法明显提高，有利于检出血管壁及血小板质和量的缺陷。由于临床上由药物治疗引起的BT延长常见，故测定前应仔细询问病人用药情况，如是否服用阿司匹林、口服抗凝药及某些抗生素等。

1.BT延长 ①血小板数量异常：原发性血小板减少紫癜、原发性血小板增多症。②血小板功能缺陷：血小板无力症、药物引起的血小板病、骨髓增生异常综合征等。③血管性血友病（VWD）。④血管壁及结构异常（少见）：遗传性出血性毛细血管扩张症等。⑤偶见于严重的凝血因子缺乏：如凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ或纤维蛋白缺乏；弥散性血管内凝血；也见于接受大量输血后患者。

2.BT缩短 主要见于某些严重的血栓前状态和血栓形成。如妊娠高血压综合征、心肌梗死、DIC高凝期等。