【摘要】:在细胞培养液中加入血清,虽然有利于细胞生长,但却给分化调控研究带来了不便。Kruse等提出:角膜缘干细胞无血清单细胞克隆培养法,这种方法是在MCDB151基础培养基中加入胰岛素转铁蛋白氢化可的松、硒、钙、磷酸乙醇胺等,它适合于TAC细胞增殖。而干细胞在此培养条件下保持静态。因此,就可以用它来研究调节干细胞转化为TAC细胞的各种因素和因子。3.溴胱氧尿苷标记 BrdU标记指数是BrdU阳性细胞与克隆细胞总数的比例。
在细胞培养液中加入血清,虽然有利于细胞生长,但却给分化调控研究带来了不便。Kruse等(1991)提出:角膜缘干细胞无血清单细胞克隆培养法,这种方法是在MCDB151基础培养基中加入胰岛素转铁蛋白氢化可的松、硒、钙、磷酸乙醇胺等,它适合于TAC细胞增殖。而干细胞在此培养条件下保持静态。因此,就可以用它来研究调节干细胞转化为TAC细胞的各种因素和因子。评价方法有下列3种:
1.克隆形成系数(clone formative exponent,CFE) 评价能形成克隆种植细胞的比例。
2.克隆分类 小克隆为细胞数小于10个,中克隆为细胞数介于10~20个,大克隆为细胞数大于20个。
3.溴胱氧尿苷(bromine deoxyuridine,BrdU)标记 BrdU标记指数是BrdU阳性细胞与克隆细胞总数的比例。
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