【摘要】:对于真菌感染,传统的诊断及分类方法是根据真菌的形态学及细胞生理生化,常出现假阴性。近年来分子生物学的发展为真菌的快速诊断及分型提供了新的手段。1.按DNA碱基组成比例分类 研究发现,同类真菌核中DNA具有一定的核酸序列同源性及基因大小相似性,因此有学者提出按DNA碱基组成比例,即作为真菌分类与鉴定的依据。通常用易于提取DNA片段的菌作杂交以鉴定其同源性。
对于真菌感染,传统的诊断及分类方法是根据真菌的形态学及细胞生理生化,常出现假阴性。近年来分子生物学的发展为真菌的快速诊断及分型提供了新的手段。
1.按DNA碱基组成比例分类 研究发现,同类真菌核中DNA具有一定的核酸序列同源性及基因大小相似性,因此有学者提出按DNA碱基组成比例,即(G+Cmol%)作为真菌分类与鉴定的依据。例如念珠菌属的(G+Cmol%)均值为43.7,其中白色念珠菌为35.5~35.1,而曲霉菌属均值为53.5,镰刀菌属为52.0。
2.以DNA-DNA或DNA-rRNA间同源性分类 近年的研究发现,应用分子杂交技术对不同菌属间DNA-DNA或DNA-rRNA间同源性程度分析真菌类别,其结果可靠。通常用易于提取DNA片段的菌作杂交以鉴定其同源性。如杂交率高达80%,则说明是同一真菌,若低于20%,则基本无关系,若介于65%~80%之间则说明为同一菌属的不同菌种。在进行分子杂交时,还可应用限制性核酸内切酶消化染色体DNA再进行电泳分析,按相同重复序列的多少进行分类的依据。
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