梅毒螺旋体的检查

1．形态学观察　取梅毒患者硬性下疳、梅毒疹的渗出物或局部淋巴组织的抽取液，墨汁染色湿片在暗视野下检查螺旋体，有运动活泼的密螺旋体有助于诊断。也可采用Fontana镀银染色，菌体变粗易于查见，光学显微镜下呈棕褐色。

2．分离及培养　梅毒螺旋体的培养十分困难，在含有白蛋白、胰蛋白胨盐、胱胺酸等的厌氧培养基中，25℃下能维持4～7d。采用棉尾兔单层上皮细胞在微氧条件下可保持毒力。接种在兔睾丸内可存活，但毒力丧失。

3．检测非特异性抗体　由于梅毒螺旋体的分离和培养十分困难，因此目前诊断梅毒感染多依赖血清学检查，了解患者血清特异性抗体或非特异性抗体的水平。非特异性抗体是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放的物质，不具备保护作用，称反应素。因此检测非特异性抗体的试验又称反应素试验，是用牛心类脂作为抗原，加入适量胆固醇和卵磷脂以提高灵敏度，检测患者血清中的反应素。其检测方法包括补体结合试验和絮状沉淀试验。前者因操作繁琐，结果不可靠而基本被淘汰。后者包括：性病研究实验室试验（VDRL）、不加热血清反应素试验（USR）及快速血清反应素试验（RPR）。各种方法操作简单，VDRL法结果准确性高，为最常用的方法；USR敏感性高而特异性较低；而RPR方法肉眼即可分辨结果。

4．检测特异性抗体　是用梅毒螺旋体作为抗原，检测患者血清中梅毒螺旋体特异性抗体，包括IgM及少量的IgG和IgA。常用的方法有以下几种：

（1）螺旋体制动试验：检测患者血清内是否有可使梅毒螺旋体活动受到抑制的抗体。此方法特异性高而敏感性低。

（2）荧光螺旋体抗体吸收试验：为间接免疫荧光试验。将患者的血清与涂在玻片上的灭活螺旋体共同孵育，再加入荧光素标记的抗人梅毒螺旋体抗体，荧光显微镜下观察，有荧光者为阳性，敏感性很高。常在试验前在患者血清内加入适量Reiter螺旋体超声波裂解物以去除可能存在的交叉反应性抗体，使此方法的特异性大大提高。

（3）螺旋体血凝试验：先用梅毒螺旋体Nichols株的超声裂解物致敏红细胞，与经Reiter螺旋体超声波裂解物去除交叉反应性抗体的患者血清反应，凝血板上观察血凝情况，操作简单、结果准确，是常用的方法之一。

（4）其他：如酶联免疫吸附试验。上述方法难以鉴别母亲体液免疫反应和婴儿特异性反应，而免疫印迹法恰好适用于检测婴儿血清内特异性梅毒螺旋体抗体IgM，诊断新生儿梅毒。

非特异性梅毒螺旋体抗原试验的敏感性和特异性均低，但可监测疗效。特异性梅毒螺旋体抗原试验的准确性虽高，但为永久阳性。因此，对于可疑患者应同时作两类检查。

5．聚合酶链反应　常用来扩增以作为检测梅毒螺旋体的目的基因有：TmpA基因、tpp47基因、tpf-1或tpf-2基因及bmp基因等。在诊断先天性梅毒和神经梅毒中有一定优越性。