【摘要】：Lyso-Tracker Red染料、Hank’s液，共聚焦专用petri皿等。工作液中Lyso-Tracker Red的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的Lyso-Tracker Red。
（一）实验目的
细胞内溶酶体染色及检测方法。
（二）实验试剂
Lyso-Tracker Red（1mmol/L储存液）染料、Hank’s液（Hank’s-buffered saline solution，HBSS），共聚焦专用petri皿等。
（三）实验流程
1.细胞在共聚焦专用培养皿中培养，生长70%～80%融合。
2.HBSS液洗3次。
3.HBSS稀释Lyso-Tracker Red，使其终浓度为50～75nmol/L，37℃预热，每皿细胞加入100μl，使其覆盖中间玻璃片。
4.37℃5%CO2孵箱孵育30min。
5.HBSS液洗3次后，孵箱中放置10min。
6.共聚焦显微镜选择激发波长559nm激光，选择615nm（红色）通道观察。
7.设置好仪器参数，扫描获得清晰图像。
（四）注意事项
工作液中Lyso-Tracker Red的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的Lyso-Tracker Red。
（五）典型举例
图1-30显示了犬肾MDCK细胞内的溶酶体的位置。
图1-30 MDCK细胞溶酶体染色
红色代表溶酶体，绿色代表高尔基体上的神经酰胺，蓝色代表细胞核（×600）
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