【摘要】：细胞在共聚焦专用培养皿中培养，生长70%～80%融合。共聚焦显微镜选择激发波长405nm激光，选择500nm通道观察。随机选择8～10个细胞动态扫描细胞内Na+的荧光吸光度变化，每隔2s扫描1次，连续扫描2min，获得图像及荧光强度变化曲线。
（一）实验目的
检测细胞内Na+浓度变化。
（二）实验材料
SBFI探针（10mmol/L储存液）、Hank’s缓冲液。
（三）实验流程
1.细胞在共聚焦专用培养皿中培养，生长70%～80%融合。
2.用HBSS液洗3次。
3.用HBSS稀释SBFI探针，使其终浓度为5～10μmol/L，37℃预热，每皿细胞加入100μl，覆盖中间玻璃片。
4.37℃5%CO2孵箱培养40min。
5.HBSS液洗3次后，孵箱中放置10min。
6.共聚焦显微镜选择激发波长405nm激光，选择500nm通道观察。
7.设置好仪器参数，启动TimeScan程序，随机选择8～10个细胞动态扫描细胞内Na+的荧光吸光度变化，每隔2s扫描1次，连续扫描2min，获得图像及荧光强度变化曲线。
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