【摘要】：可能原因：染色时细胞接触染料的面积、生长在边缘和中间细胞的细胞膜状态不同，也可能因探针跨细胞膜能力不够、探针分布不均匀、标记的温度和时间等条件不当。
1.细胞荧光标记强度过高，甚至饱和，或刚好相反，即所有细胞荧光都很弱。
（1）可能原因：所使用荧光探针浓度不当；标记条件不当，如样品与探针孵育温度或时间不足；荧光弱也可能是由于荧光探针失效等原因，需认真排查。
（2）克服方法
①调整荧光探针的浓度。
②改变标记条件，如标记探针与样品的反应时间。
③检查探针是否失效，重新配制探针。
2.“环岛效应”或“边缘效应”，表现为连成片的细胞最外环的边缘的细胞荧光强度明显高于被包围在中间的细胞的荧光强度。
（1）可能原因：染色时细胞接触染料的面积、生长在边缘和中间细胞的细胞膜状态不同，也可能因探针跨细胞膜能力不够、探针分布不均匀、标记的温度和时间等条件不当。
（2）克服方法
①在不影响实验效果的前提下，尽量减低细胞种植密度。
②由于染料浓度过高时更容易产生边缘效应，因此可以适当降低探针浓度。
③适当延长标记时间，以使染料在细胞间达到充分的平衡时间。
④染色后，上机前要进行充分洗涤附着探针（不需要洗涤的探针除外）。
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