【摘要】：原位分子杂交与免疫组织化学双重染色指同一组织切片上用原位杂交和免疫组化同时进行标记，显示相关基因和蛋白质的表达和分布情况。[1]师锁柱，田月，陈庆砾，等.肾脏标本的原位杂交与免疫组织化学双标记技术.中华肾脏病杂志，2002,18:446-447.
原位分子杂交与免疫组织化学双重染色指同一组织切片上用原位杂交和免疫组化同时进行标记，显示相关基因和蛋白质的表达和分布情况。
（一）操作步骤（原位杂交发色后）
1.入3%H2O2，4℃孵育10min，消除内源性过氧化物酶的活性。
2.入PBS洗，加0.05%胰酶37℃孵育20min或采用微波抗原修复。
3.入PBS洗，血清室温封闭，10～20min。
4.加一抗室温或4℃过夜。
5.入PBS洗，加生物素标记的二抗工作液室温20～40min。
6.入PBS洗，加辣根酶标记链酶卵白素工作液室温20～40min。
7.入PBS洗，显色剂DAB发色5～10min。
8.自来水洗，梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片（图3-20）。
图3-20 ICAM-1mRNA（棕黄色）/Ed-1（蓝黑色）（×400）
参考文献
[1]师锁柱，田月，陈庆砾，等.肾脏标本的原位杂交与免疫组织化学双标记技术.中华肾脏病杂志，2002,18:446-447.
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