【摘要】:同时在该位置两端用缝线结扎输精管,距离4~5mm。在两结扎点间剪断输精管,置其于纱布上确定此侧手术完毕。手术后小鼠饲养2周后确定手术是否成功。有阴道栓的母鼠,用磷酸缓冲液处理后24h,其输卵管潮红。卵细胞应该处于单细胞期或未受孕状态,若处于双细胞期,则输精管切除未完全,雄性小鼠应进行再筛选。
1.称重后麻醉小鼠,背位固定小鼠,大剪刀贴近皮肤剪毛,70%的乙醇涂搽消毒手术切口部位,以防止毛发污染切口。
2.于生殖器前方大约1.3cm处横行剪开下腹部皮肤,做约1cm的切口,用浸70%乙醇的纱布搽拭切口部位以清理毛发。
3.切开腹膜,进行膀胱定位。每侧都可见有一条管道走行,用镊子轻轻夹持左侧管道,提起部分使手术视野清晰可见,确定其为输精管。
4.将镊子插进输精管下方,使它们处于自然状态,其末端垂直。同时在该位置两端用缝线结扎输精管,距离4~5mm。在两结扎点间剪断输精管,置其于纱布上确定此侧手术完毕。
5.将输精管两个断端轻轻放回腹腔,如上处理右侧输精管。两侧手术完毕后,2~3根单独缝线缝合腹壁切口。待用缝线须浸泡在70%乙醇中,保持缝线湿润,防止结扎时黏附组织。用2个或3个自动小夹夹闭皮肤。
6.为保暖包裹小鼠于纱布中或将其放置于热垫内使其苏醒,处于麻醉状态下的小鼠应该严格监护直到其完全苏醒。手术后小鼠饲养2周后确定手术是否成功。
7.实验性饲养 将1~2只母鼠与输精管切除小鼠合笼饲养,次晨进行阴道栓检查。有阴道栓的母鼠,用磷酸缓冲液处理后24h,其输卵管潮红。卵细胞应该处于单细胞期或未受孕状态,若处于双细胞期,则输精管切除未完全,雄性小鼠应进行再筛选。
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