常用免疫学检查

一、免疫球蛋白检查

免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）是一组具有抗体活性的球蛋白，由浆细胞合成与分泌，分布于血液、体液及部分细胞的表面。免疫球蛋白分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五类。

（一）IgG、IgA、IgM测定

IgG为人体含量最多和最主要的Ig，占免疫球蛋白的70%～80%。它对病毒、细菌和寄生虫等都有抗体活性，也是唯一能够通过胎盘的Ig。IgA分为血清型IgA与分泌型IgA（SIgA）两种，前者占血清总Ig的10%～15%，后者在外分泌系统中有重要的免疫功能。呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴样组织合成大量的SIgA，SIgA与这些部位的局部感染、炎症或肿瘤等病变密切相关。IgM是相对分子质量最大的Ig，约占血清总Ig的5%～10%；它是有效的凝集和溶解细胞的因子。

1．标本采集方法　静脉血3m l。

2．参考值　单向免疫扩散法：IgG为7.6～16.6g/L；IgA为0.71～3.35g/L；IgM为0.48～2.12g/L。

3．临床意义

（1）IgG、IgA、IgM均增高：见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。

（2）单一Ig增高：主要见于多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等免疫增殖性疾病。

（3）Ig减低：见于各类先天性免疫缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的患者。

（二）IgE测定

IgE主要由鼻咽部、扁桃体、支气管、胃肠道等黏膜固有层的浆细胞分泌，血清含量为血清总Ig的0.002%，能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜结合，在I型变态反应性疾病的发病中具有重要作用。

1．标本采集方法　静脉血3m l。

2．参考值　ELISA法：0.1～0.9mg/L。

3．临床意义

（1）IgE增高：见于各种过敏性疾病，如异位性皮炎、过敏性哮喘、过敏性鼻炎、间质性肺炎、荨麻疹、嗜酸性粒细胞增多症等；其他疾病，如IgE型骨髓瘤、急慢性肝炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、寄生虫感染等。

（2）IgE降低：见于先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期用免疫抑制剂等。

二、血清补体检查

补体（complement，C）是血清中一组具有酶原活性的糖蛋白，由传统途径的9种成分C1（C1q、C1 r、C1s）～C9，旁路途径的3种成分及其衍生物、B、D、P、H、I等因子组成。补体、体液因子或免疫细胞共同参与灭活病原体的免疫反应，也参与破坏自身组织或自身细胞而造成的免疫损伤。

（一）总补体溶血活性测定

总补体溶血活性（total complement hemolysis activity，CH50）所反映的主要是补体9种成分的综合水平。一般以50%的溶血率（CH50）作为判别点。

1．标本采集方法　静脉血3m l。避免溶血。

2．参考值　试管法：50000～100000U/L。

3．临床意义

（1）CH50增高：见于急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤。

（2）CH50减低：见于肾小球肾炎、自身免疫性疾病、感染性心内膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病等。

（二）血清补体C3测定

血清补体C3测定（complement 3，C3）是血清中含量最高的补体成分，在补体经典激活途径与旁路途径中均发挥重要作用。补体C3是急性时相反应蛋白。

1．标本采集方法　静脉血3m l。避免溶血。

2．参考值　单向免疫扩散法为（1.14±0.27）g/L。

3．临床意义

（1）增高：见于急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、排异反应。

（2）减低：见于急性肾小球肾炎、狼疮性肾炎、系统性红斑狼疮活动期、肝硬化等。

（三）血清补体C4测定

1．标本采集方法　静脉血3m l。避免溶血。

2．参考值　单向免疫扩散法为（0.55±0.11）g/L。

3．临床意义

（1）增高：见于急性风湿热、结性动脉周围炎、皮肌炎、关节炎等。

（2）减低：见于狼疮性肾炎、自身免疫性肝炎、胰腺癌、多发性硬化症、类风湿性关节炎等。

三、感染免疫检测

（一）抗链球菌溶血素“O”（anti-streptolysin“O”，ASO）测定

1．标本采集方法　静脉血3m l。

2．参考值　胶乳凝集法：＜500U或滴度＜1∶400。

3．临床意义　ASO增高见于A族溶血性链球菌感染引起的疾病，如感染性心内膜炎、扁桃体炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。

（二）肥达反应（W idal reactin，WR）

1．原理　机体感染伤寒、副伤寒沙门菌后，能逐渐产生抗菌体“O”抗原和鞭毛“H”抗原的相应抗体。肥达反应是以伤寒、副伤寒沙门菌液为抗原，检测患者血清中有无相应抗体的一种凝集试验。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　伤寒“O”凝集价＜1∶80；伤寒“H”凝集价＜1∶160；副伤寒A、B、C凝集价＜1∶80。

4．临床意义　WR阳性一般出现在伤寒发病后一周，阳性率为10%；第二周上升为60%～70%；第四周可达90%以上。单份血清抗体效价“O”大于1∶80及“H”大于1∶160者有诊断意义；若动态观察，WR持续超过参考值或较原效价升高4倍以上更有价值。接种伤寒菌苗或以往患过伤寒者，血清中可出现阳性反应，其抗体效价比参考值偏高。

（三）结核分枝杆菌抗体（tubercle bacillus antibody，TB-Ab）和DNA测定

1．原理　感染结核分枝杆菌后，体内可产生特异性抗体TB-Ab。将结核杆菌抗原包被在固相载体上，与待测血清反应，检测血清中抗结核IgG抗体；用PCR方法可检测结核分枝杆菌的DNA。

2．标本采集方法　全血5m l（抗体检测）；痰液标本（DNA）测定。

3．参考值　ELISA法：结核抗体为阴性；PCR法：结核分枝杆菌DNA为阴性。

4．临床意义　抗体阳性表示有结核分枝杆菌感染；PCR检测结核分枝杆菌DNA的特异性、敏感性均高，但需防止标本污染出现假阳性。

（四）肾综合征出血热病毒抗体测定

1．原理　肾综合征出血热的病原体是汉坦病毒（Hantavirus，HTV）。抗-HTV IgM是感染HTV后出现于患者血清中的一种特异性抗体。

2．标本采集方法　全血3m l。

3．参考值　ELISA法：阴性。

4．临床意义　感染HTV后4～5天，血清中可检出抗-HTV IgM，7～10天，其达高峰，阳性率可达95%，其后开始下降。检测抗-HTV IgM有助于早期诊断。

（五）柯萨奇病毒抗体测定

1．标本采集方法　全血3m l。

2．参考值　间接血凝试验、ELISA法：均阴性。

3．临床意义　柯萨奇病毒IgM抗体阳性提示现症感染；特异性IgG为中和抗体，阳性提示既往感染。

（六）巨细胞病毒抗体测定

1．原理　巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）是一种疱疹病毒，有双链DNA，感染人体后可产生特异性抗-CMV。

2．标本采集方法　全血3m l。

3．参考值　ELISA法：阴性。

4．临床意义　抗-CMV测定，双份血清抗体水平呈4倍或4倍以上增长，提示近期活动性感染。

（七）弓形虫抗体测定

弓形虫感染为人畜共患性疾病，机体在感染后可产生弓形虫抗体（toxoplasma antibod-y）。临床常以检测弓形虫特异性IgM抗体进行早期诊断。

1．标本采集方法　全血3m l。

2．参考值　ELISA法：均阴性。

3．临床意义　弓形虫特异性IgM抗体增高是近期感染的指标。

（八）梅毒螺旋体抗体测定

1．标本采集方法　静脉血3m l。

2．参考值　梅毒螺旋体血凝试验（TPTA）和荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）均阴性。

3．临床意义　阳性可确定梅毒的诊断。

（九）获得性免疫缺陷病毒抗体及RNA测定

1．原理　人类免疫缺陷性病毒（human immunodeficiency virus，HIV）是艾滋病的病原体，机体感染HIV后数周至半年后，多数患者体内可出现抗-HIV抗体。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　阴性。

4．临床意义　筛选试验常用ELISA法，敏感性高，但有假阳性。筛选试验阳性时，需用蛋白印迹试验或RT-PCR法做确诊试验，阳性对肯定诊断有价值。

四、肿瘤标志物检测

肿瘤标志物（tumormarker，TM）是指在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。检测TM对肿瘤的诊断、鉴别诊断、疗效和预后判断具有一定的临床价值。肿瘤标志物动态测定有助于良、恶性疾患的鉴别，还可提示肿瘤是否复发和转移。

（一）血清甲胎蛋白测定

1．原理　甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是胎儿发育早期由肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白。出生后，AFP逐渐消失。当肝细胞或生殖腺胚胎组织发生恶变时，原已丧失合成AFP能力的细胞又重新开始合成，使血AFP增高。检测血AFP浓度对诊断肝脏及滋养细胞恶性肿瘤有重要临床价值。

2．标本采集方法　空腹静脉血3m l。

3．参考值　对流免疫电泳法为阴性；ELISA法：＜25μg/L。

4．临床意义

（1）原发性肝细胞癌：AFP＞300μg/L有诊断意义；

（2）其他：生殖腺胚胎瘤（如睾丸癌、畸胎瘤、卵巢癌等）；病毒性肝炎、肝硬化；妊娠3个月后，AFP开始增高，分娩后3周恢复正常。

（二）血清癌胚抗原测定

1．原理　癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是一种富含多糖的蛋白复合物。人出生后，其含量极低，但在部分恶性肿瘤患者血清中，CEA含量可异常增高。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　ELISA法：＜15μg/L。

4．临床意义　CEA增高见于结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、胰腺癌等，以及恶性肿瘤恶化时；此外，结肠炎、肝硬化、肺气肿等也会增高。

（三）癌抗原125测定

1．原理　癌抗原125（cancer antigen 125，CA125）为一种糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内。当患有上皮性卵巢癌和子宫内膜癌时，患者血清CA125水平明显升高。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　ELISA法：＜35000U/L。

4．临床意义　CA125增高见于：①卵巢癌；②其他癌症：宫颈癌、乳腺癌、胰腺癌、胆道癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、肺癌等；③其他疾病：子宫内膜异位症、盆腔炎、卵巢囊肿、胰腺炎、肝炎、肝硬化等。

（四）癌抗原15-3测定

1．原理　癌抗原15-3（cancer antigen 15-3，CA15-3）是一种乳腺癌相关抗原，对乳腺癌的诊断和术后随访监测有一定的价值。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　ELISA法：＜25000U/L。

4．临床意义　CA15-3增高见于：①乳腺癌；②其他恶性肿瘤：肺癌、肾癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌、原发性肝癌等。

（五）糖链抗原19-9测定

1．原理　糖链抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）是一种糖蛋白。胚胎期分布于胎儿的胰腺、肝胆和肠等组织；在成人的胰、胆等部位也有少量存在。当患胰腺癌、肝胆和胃肠道癌时，血中CA19-9的水平可明显升高。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　ELISA法：＜37000U/L。

4．临床意义　CA19-9增高见于：①胰腺癌、胆囊癌、胆管壶腹癌、胃癌、结肠癌、肝癌等消化道恶性肿瘤；②其他疾病：急性胰腺炎、胆囊炎、肝硬化、肝炎等。

（六）前列腺特异抗原测定

1．原理　前列腺特异抗原（prostate specific antigen，PSA）是一种由前列腺分泌的单链糖蛋白，它存在于前列腺管道的上皮细胞中。在前列腺癌时可见PSA血清水平明显升高。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　免疫放射分析法或化学发光分析法：均＜4μg/L。

4．临床意义　血清PSA测定是前列腺癌早期诊断有价值的试验，血清中PSA＞10μg/L作为诊断界限值；定期随访PSA，有助于前列腺癌治疗疗效、复发及转移的判断，也是对转移性骨肿瘤寻找原发病灶的重要鉴别诊断依据；良性前列腺增生患者血清PSA亦可升高，大多小于20μg/L。

五、自身免疫检测

（一）类风湿因子测定

1．原理　类风湿因子（rheumatoid factor，RF）是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内，包括IgG、IgA、IgM、IgD、IgE 5种类型。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　阴性。

4．临床意义　类风湿性关节炎的阳性率为70%；其他自身免疫性疾病，如多发性肌炎、硬皮病、干燥综合征、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、慢性活动性肝炎等也可出现阳性；某些感染性疾病，如结核病、感染性心内膜炎等可呈现阳性反应。

（二）抗核抗体检测

1．原理　抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）是以细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　间接荧光抗体法为阴性；血清滴度＞1∶40为阳性。

4．临床意义　ANA阳性多见于：①未治疗的系统性红斑狼疮，阳性率可达80%～100%；②其他自身免疫性疾病：多发性肌炎、全身性硬皮病、干燥综合征、类风湿性关节炎等。

（三）抗脱氧核糖核酸抗体测定

1．原理　抗脱氧核糖核酸抗体（anti-DNA antibody，抗-DNA）分为抗双链DNA（doub-le stranded-DNA，ds-DNA）抗体、抗单链DNA（single stranded-DNA，ss-DNA）抗体和抗Z-DNA抗体。抗ds-DNA抗体的靶抗原是细胞核中DNA的双螺旋结构，它的检测有临床的重要性。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　免疫荧光法为阴性；间接酶标抗体染色法为阴性。

4．临床意义

（1）抗ds-DNA抗体阳性：见于活动期系统红斑狼疮、阳性率70%～90%，特异性达95%，敏感性较低，但对于系统性红斑狼疮的诊断和治疗监测极为重要。

（2）抗ss-DNA抗体阳性：见于系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎等，不具特异性。

（四）可提取性核抗原多肽抗体谱测定

1．原理　可提取的核抗原（ENA）由多种相对分子质量不同的多肽构成。利用免疫印迹试验可以对这些抗原的自身抗体进行检测，用来反应某些自身免疫病的状况。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　免疫印迹试验（IBT）为阴性。

4．临床意义

（1）抗Sm抗体（即抗Smith抗体）阳性：该抗体为系统性红斑狼疮所特有，诊断疾病的特异性为99%，且能反映疾病活动程度。还可见于中枢神经系统、肾脏疾病、肺纤维化及心内膜炎等疾病。

（2）抗组蛋白抗体阳性：见于系统性红斑狼疮、药物性狼疮、类风湿性关节炎及原发性胆汁性肝硬化。

（五）抗组织细胞抗体检测

1．抗线粒体抗体测定

抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibody，AMA）是一组以线粒体内膜和外膜蛋白为靶抗原，具有非器官特异性和非种属特异性为特点的自身抗体。

（1）标本采集方法：静脉血3m l。

（2）参考值：ELISA法为阴性。

（3）临床意义：AMA阳性主要见于肝脏疾病，如原发性胆汁性肝硬化时，AMA阳性率可达90%以上；胆总管阻塞和继发性胆汁性肝硬化时，AMA均为阴性。

2．抗甲状腺球蛋白抗体测定

甲状腺球蛋白是由甲状腺滤泡细胞合成的一种糖蛋白，抗甲状腺球蛋白抗体（anti-thy-roglobulin antibody，ATG）是自身抗体之一。

（1）标本采集方法：静脉血3m l。

（2）参考值：ELISA法：阴性。

（3）临床意义：ATG阳性多见于桥本甲状腺炎、甲状腺功能亢进、甲状腺癌、重症肌无力等。

3．抗平滑肌抗体测定

抗平滑肌抗体（anti-smoothmuscle antibody，ASMA）是一种主要存在于狼疮性肝炎患者血清中的一种自身抗体。

（1）标本采集方法：静脉血3m l。

（2）参考值：间接荧光抗体法为阴性；滴度＞1∶10为阳性。

（3）临床意义：狼疮性肝炎患者的阳性率高达80%；急性肝炎患者的阳性率为70%，但在发病一周时出现，3月后消失。

六、其他免疫检测

（一）循环免疫复合物检测

1．原理　循环免疫复合物（circulating immunocomplex，CIC）是存在于血液和体液中的抗原与相应抗体的复合物。临床检测的常为血液中的CIC。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　免疫比浊法为（4.3±2.0）%。

4．临床意义　CIC增高（超过8.5%）见于血清病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、慢性活动性肝炎、血管炎等。

（二）C反应蛋白测定

1．原理　C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是一种能与肺炎双球菌C多糖发生反应的急性时相反应蛋白，主要由肝脏产生。

2．标本采集方法　静脉血3m l。

3．参考值　免疫比浊法为阴性；单向免疫扩散法为低于8mg/L。

4．临床意义　CRP升高见于化脓性感染、心肌梗死、恶性肿瘤、严重创伤、各种细菌感染、风湿热活动期、器官移植急性排斥反应等。