一 实验原理:
1.在高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。
2.染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的存在状态,就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。
二 观察细胞有丝分裂的实验过程
步 骤
注 意 问 题
分 析
一、根尖的培养
置于温暖处,常换水。
因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。
二、装片的制作
(解离→漂洗→染色→制片)
1.解离:
解离液:质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精的混合液(1:1)
解离时间要保证,细胞才能分散开来。
解离时间也不宜过长。
目的:溶解细胞间质,使组织中的细胞相互分离开来。此时,细胞已被盐酸杀死。
否则,根尖过于酥软,无法取出。
2.漂洗:清水的玻璃皿中漂洗约10 min。
漂洗要充分,可换水1~2次。
目的:洗去解离液,便于染色。
3.染色:质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。
染色时间不宜过长,否则显微镜下一片紫色,无法观察。
龙胆紫等为碱性染料,可使染色体着色。醋酸洋红溶液也能使染色体着色
4.制片:用镊子将这段洋葱根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把洋葱根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻地压载玻片,使细胞分散开来。
要弄碎根尖,再垂直向下均匀用力压片,不可移动盖玻片,
目的:使细胞分散,避免细胞重叠,便于观察。做得成功的装片,标本被压成云雾状。
三、观察
1.低倍镜观察:把装片放在低倍镜下,慢慢移动装片,找到分生区细胞。
2.高倍镜观察:移走低倍镜,换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,仔细观察,找出处于细胞分裂期中期的细胞,再找出前期、后期、末期的细胞。
一定要找到分生区。
分生区细胞特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正处于分裂期。
三 讨论
制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么?
答:制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点:(1)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间;(2)解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离;(3)压片时,用力的大小要适当,要使根尖被压平,细胞分散开
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