微卫星标记在肉羊杂交中的应用研究

微卫星（Microsatellites）是近年来发展起来的一种新型DNA分子标记，通常是由长度为2～6个bp的核心序列串联重复而成，广泛存在于DNA编码区和非编码区，具有高度的遗传多态性，遵循孟德尔遗传规律。微卫星DNA的一个最重要的特性是高度的等位基因位点多态性，经常是一个微卫星位点含多个等位基因。因此，利用微卫星标记的多态性，进行不同标记群体之间的生产性能差异显著性分析，从中寻找与生产性状位点相连锁的遗传标记，可为开展分子育种和遗传标记辅助选择提供科学依据。

利用微卫星标记的多态性与保守性，诸多学者在绵羊遗传关系及育种生产上进行了深入研究。杨燕，马月辉，吕慎金等（2004）人利用26个微卫星标记分析了中国7个地方绵羊（Ovis aries）品种的遗传多样性。通过计算基因频率、平均杂合度（H）、多态信息含量（PIC）及有效等位基因数（Ne），并根据Nei氏标准遗传距离，利用UPGMA法进行了聚类分析，评估其种内遗传变异和品种间遗传关系。结果表明26个微卫星位点共检测到 278个等位基因，Nei在2.1288-13.3924之间；以等位基因频率为基础，得出位点的平均杂合度在0.0629-0.5903 之间，品种平均杂合度在 0.3633-0.4489之间。26个位点均为高度多态位点，PIC在0.6628-0.8712之间。聚类分析表明哈萨克羊、阿勒泰羊和巴音布鲁克羊遗传关系最近，然后与白藏羊、黑藏羊聚为一类；湖羊和晋中羊聚为一类。各绵羊品种的聚类关系与其来源、育成史及地理分布基本一致。储明星、孙少华等学者利用SSR多态性对小尾寒羊和湖羊等品种进行了遗传距离测定，取得了较好效果。杨燕、马月辉等人运用微卫星标记技术，对中国4个地方绵羊品种（湖羊、哈萨克羊、巴音布鲁克羊和晋中羊）从群体遗传学的角度进行研究和评价，以期发现中国绵羊品种遗传资源多样性，并为保护和利用中国特有的绵羊品种资源提供理论依据。李祥龙等人利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究了中国蒙古羊、乌珠穆沁羊、哈萨克羊、阿勒泰羊、滩羊和藏绵羊6个地方绵羊品种17个微卫星标记的多态性，以探讨其遗传多样性、起源分化及群体间的遗传亲缘关系。贾斌、陈杰等人利用10个微卫星标记，对新疆北疆地区哈萨克羊、阿勒泰羊、巴什拜羊、中国美利奴羊等8个品种、1个杂交一代绵羊群体遗传多样性进行了检测。王吉振等人分析了4个微卫星基因座BM143、Oar HH35、Oar AE101、BMS2508在7个绵羊群体（小尾寒羊、湖羊、乌珠穆沁羊、萨福克羊、多赛特羊、夏洛来羊、多赛特公羊与小尾寒羊母羊的F1代杂种羊）286只绵羊中的遗传多态性。结果表明，这4个微卫星标记在7个绵羊群体中的等位基因数分别为9、11、14 和 9，其多态信息含量、有效等位基因数、杂合度分别为017073/317231/017314、018267/614399/018447、015743/215178/016028、016172/310712/016744，其中Oar HH35的遗传变异最大，Oar AE101最小。7个绵羊群体中小尾寒羊的遗传变异最大，湖羊的最小。基于Nei 氏 DA 距离和 DS 标准遗传距离，采用UPGMA方法构建了系统发生树。该发生树将中国地方品种（小尾寒羊、乌珠穆沁羊、湖羊）和法国的夏洛来羊归为一类，将F1杂种羊、英国品种（萨福克羊和多赛特羊）归为另一类。张英杰，刘月琴等（2004）利用五个微卫星标记（Oar FCB11、Oar AE101、MCM218、MCM38 和Oar CP9）对萨福克、陶塞特、得克塞儿及小尾寒羊遗传距离进行了遗传检测，并测定了萨福克、陶塞特、得克塞儿与小尾寒羊杂一代四月龄前的生产性能。结果表明萨福克与小尾寒羊的遗传距离大于陶塞特，陶塞特与小尾寒羊的遗传距离大于得克塞儿，与实际杂种优势（四月龄前）测定结果相符。Juan-José ARRANZ等人分析了18个微卫星基因座ADCYC， BM1258，BM143，BM4621，BM6444， ILSTS002，MAF33，MAF36，MAF48， MAF64，MAF65，MAF70，Oar CP34，Oar FCB11，TGLA13，TGLA53， CSSM06， CSSM66在5个绵羊群体（Churra，Latxa，Castellana，Rasa-Aragonesa and Merino）中的遗传多样性。贾斌、杨章平（2005）等人也利用微卫星标记技术对新疆及南方的绵山羊品种遗传多样性进行了分析，取得了令人满意的结果。事实证明微卫星技术在遗传多样性分析及系统发生关系判定方面具有易操作、多态性好等优点，应用效果明显。目前，绵羊微卫星基因分型技术为检查品种（群体）之间的遗传关系提供了一个有用的工具。

选择若干微卫星位点作为遗传标记，分析其多态性进行遗传距离测定等，可为中国东北地区绵羊品种资源的深入研究及肉羊的杂交改良利用提供理论依据，同时结合生产实际数据相互印证，可预测萨福克、陶塞特等羊与小尾寒羊、东北细毛羊等品种间的杂种优势，初步筛选出较优化的杂交组合，对于指导生产具有重大意义。