气相色谱外标法测定荔枝酒中风味物质

气相色谱外标法测定荔枝酒中风味物质

谷向春　肖冬光⁽¹⁾　邹静　丁书美

（天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室　天津　300222）

摘要：本文研究了气相色谱法（GC）定性、定量检测荔枝酒中的风味物质。运用保留时间法定性得出荔枝酒中含有正丙醇、异丁醇、异戊醇3种高级醇和乙酸乙酯、乙酸异戊酯2种酯类，并运用外标法定量了各物质的含量。峰面积外标法定量，测得相对标准偏差为0.08%～0.53%，回收率在94.8%～101.5%之间，有操作简便快捷、精密度好、准确度高的特点。

关键字：荔枝酒；气相色谱；风味物质；外标法

荔枝（Litchi） ，为我国南方特有水果，果肉柔嫩汁，含较高糖分、适量有机酸以及多种氨基酸，营养价值高，风味独特，誉为果中珍品^[1]。用荔枝酿成的荔枝酒具有清新果香和浓郁酒香的特点。高级醇和酯类的种类、浓度与荔枝酒的口感、品质有很大的关系，如异丁醇、异戊醇呈苦、涩味，适量的异丁醇、异戊醇、正丙醇赋予荔枝酒以醇厚感，但含量过高也会给荔枝酒带来不愉快的口感^[2]。鉴于高级醇和酯类对于荔枝酒风味的重要影响，测定荔枝酒中高级醇和酯类的组成和含量，对研究荔枝酒的质量和风味有着很重要的意义。

目前高级醇的测定方法主要有分光光度法和气相色谱法^[3]，分光光度法误差较大而且不精确，所以通常主要用气相色谱法测定，此方法简单精确。本文采用气相色谱法，以峰面积外标法定量测定荔枝酒中高级醇和酯类，方法简单精确。

1　材料与方法

1.1　试验材料

荔枝酒：自行酿制。

乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯，均为色谱纯；乙醇均为分析纯。

1.2　标准溶液的配制

1.2.1　乙醇标准溶液的配制

准确量取550ml无水乙醇，用蒸馏水定容至1000ml得到55% （v/v）的乙醇基础溶液。

1.2.2　标准物质溶液的配制

准确量取乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇和乙酸异戊酯各2ml，分别用乙醇标准溶液定容至100ml，得到乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯2%的标准溶液，冷藏备用。

1.2.3　混合标准溶液

准确量取乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯各2ml，用乙醇标准溶液定容至100ml，到各物质浓度分别为2%的混合标准溶液，冷藏备用。

1.3　样品的制备

采用减压蒸馏法，用容量瓶取100ml荔枝酒，同时用50ml蒸馏水分3次洗涤，将酒液和洗涤液合并入蒸馏瓶中，用旋转蒸发器减压蒸发，收集溜出液至95ml左右，停止蒸馏，用蒸馏水定容至100ml，即为待测样品。

1.4　色谱条件

GC7890F气相色谱仪（上海天美科学仪器有限公司） ；柱温： 70℃；进样温度： 120℃；检测器温度： 120℃。

氢气： 42ml/min；氮气： 28ml／min；空气： 125ml/min。

分流比： 50∶1；进样方式：不分流；进样量： 1μl。

1.5　定性分析

分别进样乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯标准溶液1μl，测得保留时间。再进酒样1μl，根据各物质保留时间定性。

1.6　定量分析

采用峰外标法定量，所谓外标法就是用欲测组分的纯物质来制作标准曲线，建立标准物质含量和峰面积的线性关系，以此对荔枝酒中的待测物质定量。

2　结果与分析

2.1　标准物质的定性

保留时间法定性，是气相色谱定性分析中最方便、最可靠的方法。该方法是基于一定操作条件下，各组分保留时间一定的原理。在1.4色谱条件下测得乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯的出峰时间见表1，混合标准溶液和荔枝酒样的气相色谱图见图1和图2。结果表明，荔枝酒样中所含物质分别为乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯。

表1　各标准物质保留时间

图1　混合标准溶液气相色谱图

图2　荔枝酒酒样气相色谱图

2.2　外标法定量

运用保留时间定性后，在气相色谱条件和操作过程相同条件下，用外标法测得荔枝酒样中乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯的含量如表2所示。

表2　荔枝酒中高级醇和酯类含量

由表2可知，荔枝酒中乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯的量分别为156.6 mg/L、23.3 mg/L、33.4 mg/L、54.0 mg/L、2161.9 mg/L，其中乙酸异戊酯和乙酸乙酯的含量远比其他物质高，乙酸乙酯具有水果香味，乙酸异戊酯又称香蕉油，具有令人愉快的香蕉气味，正是由于这两种物质的高含量使得荔枝酒具有浓郁的酒香。

2.3　方法精密度的测定

对混合标准样平行进样3次，测定结果及标准差和变异系数见表3。从结果看，变异系数在0.08%～0.53%之间，此方法精确度较高。

表3　分析方法的精密性

2.4　样品回收率的测定

向荔枝酒样中加入各物质标准样，分别测定加标样品和未加标样品的高级醇和酯类的含量，根据加入量和检出量计算回收率，测定结果见表4。结果表明，各组分的回收率在94.8%～101.5%之间，此方法准确度高，适合用于荔枝酒芳香物质的分析。

表4　样品回收率

3　讨论

3.1　运用保留时间法定性出荔枝酒中风味物质为乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯五种物质，再用峰外标法定量得出乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇、乙酸异戊酯的含量分别为156.6 mg/L、23.3 mg/L、33.4 mg/L、54.0 mg/L、2161.9 mg/L。

3.2　在一定色谱条件下，各物质都有确定的保留时间，用保留时间法对荔枝酒中高级醇和酯类定性，此方法简单方便快速。用外标法对荔枝酒中的高级醇和酯类定量，此方法精密度、准确度都较高，分析结果可靠，适合用于荔枝酒中高级醇和酯类的分析。

参考文献：

[1]农业部发展南亚热带作物办公室中国热带南亚热带果树[M].北京:中国农业出版社，1998 ，901

[2]丁祥庆.对白酒中杂醇油含量的看法.酿酒科技[J]，1983，（1）:9～14

[3]赵晋府.食品工艺学[M].北京：中国轻工业出版社，2001，728～734

【注释】

(1)通讯作者： emait： xdg@tust.edu.cn