一、实验目的
1.1 学会采用浮游空气尘菌采样器收集空气中的细菌，通过培养后比较菌落的数目并得出相关结论。
1.2 测定校园不同区域空气中的细菌含量，了解不同环境中细菌的分布情况。
1.3 初步分析细菌含量分布差异的原因。
二、材料用具
2.1 培养基原料：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水、1 mol/L NaOH溶液等。
2.2 器械：恒温箱、高压灭菌锅、恒温电磁搅拌器、大烧杯、玻璃棒、培养皿数套（直径9 cm）、pH试纸、喷壶、滴管、量筒、小锥形瓶（或大试管）数只、放大镜等。
三、实验步骤
3.1 培养基的配制。采用最普遍的细菌基础培养基配方：蛋白胨10 g，酵母5 g，氯化钠10 g，琼脂15～29 g，蒸馏水1000 mL，pH值调至7.2～7.4。制法：将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，滴加1 mol/L NaOH溶液校正至pH7.2～7.4，再加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化，分装在烧瓶或试管内，在101 kPa，121 ℃高压灭菌30 min后，可分装制成斜面或平皿。
3.2 空气采样。将制好的营养琼脂培养皿放入浮游空气尘菌采样器中，设置好采样流量和体积，开始采样。注意培养皿底部要编号并记录采样的时间、地点及温度等具体情况。一般室内≤30 m2的房间放置3个琼脂平皿，放点形为对角线，＞30 m2以上的房间放五个琼脂平皿，放点形为四角、中心各一个，采样高度为1.2～1.4 m，采样点应远离墙壁1 m以上，并避开空调、门窗空气流通处。在校园内的不同区域进行采集样品。
3.3 恒温培养。将培养皿加盖放好，倒放在恒温箱中，37 ℃恒温培养48 h。
3.4 菌落计数。经过48 h的培养，培养皿中长出大小、数目不等的乳白色（或略带红色、黄色）菌落，肉眼观察并用笔在平板上进行点数（必要时可用放大镜辅助），将结果记录于表3-7中。计数时一般用透射光于平板背面或正面仔细观察，不要漏计琼脂层内和平板边缘生长的菌落。
计算空气中的细菌数，公式为：
细菌数（CFU）/ m3＝N×100/A×5/T×1000/10＝50000N/AT
注：A——平板面积，单位为cm2；
T——平板暴露时间，单位为min；
N——平板平均菌落数，单位为CFU。
表3-7 空气中细菌含量测定记录
四、思考题
4.1 空气中细菌以什么形式存在？每立方米空气中大约有多少？
4.2 细菌数量的评估标准是什么？
4.3 细菌与人们的生活有何关系？引起人体产生疾病的细菌密度是多少？
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