树莓茎尖组织培养法（工厂化育苗

（六）树莓茎尖组织培养法（工厂化育苗）

茎尖组织培养繁苗技术，是在林果、花卉等作物上扩大繁殖的一项较先进的繁苗技术，目前在生产上广泛应用。中国在20世纪七八十年代，在苹果、草莓等果树生产上，开始应用茎尖组织培养繁苗技术。但在树莓生产上进入21世纪，此项技术才得以应用。

茎尖组织培养繁苗具有繁苗快，苗木纯正、健壮、生命力强等特点，是新品种引进扩大繁殖的有效途径，是其他传统繁殖法无法比拟的。

1.茎尖组织培养（简称组培）的基础设施

（1）标准化塑料大棚（温室），棚架金属结构，棚内保温效果好，有灌水设施及自动喷雾系统。

（2）一定面积组培室，室内有上下水及暖气设施。组培室最少要有三个工作间，即培养间、接种间、准备间，前两个工作间要连通。

表3　MS培养基配方

培养间设有培养架、空调机、照明的电路系统。接种间设有超净工作台，紫外灯灭菌设施。准备室设有冰箱、高压灭菌锅、药品柜、天平、工作台等。

2.组培的主要程序及生产条件

繁殖材料处理→接种→增殖→生根→瓶外适应性培养。瓶内培养温度25℃，光照强度2500lx，光照时间每天12～14小时。瓶外适应性培养，大棚温度白天20～25℃，夜间10℃左右，相对湿度90%。

3.组培培养基

组培培养基均采用MS为基本培养基（表3），附加不同种类、浓度的生长调节剂构成培养各阶段所需的培养基。调节剂在灭菌前加入，pH调至5.6～5.8，在1～1.2大气压下灭菌20分钟。

4.组培方法

（1）材料处理剪取一节树莓枝段（夏梢去叶）→流水中冲洗干净→70%酒精灭菌30秒→0.1%氯化汞灭菌8分钟→无菌水冲洗3次。

（2）接种培养枝段处理后，将其芽鳞片及苞片剥离切取长3～5毫米，茎尖接种在附加不同浓度BA、NAA、GA的MS培养基上，通常以加BA0.5毫克／升效果最好，萌芽率可达100%，附加BA＋GA，BA＋NAA的效果次之。

（3）增殖培养增殖培养有分株和茎段两种，在增殖总数中两者分别约占70%、30%。品种间增殖系数有差异，如“澳洲红”为5～6倍，“美22”为3～4倍。培养基以Ms加BA 0.25～0.5毫克／升为宜。

（4）生根培养将生长健壮，株高约2厘米的茎梢接入生根培养基中诱导生根。生根培养基为1／2MS加1BA0.5毫克／升或1.0毫克／升，生根率均较高。不同品种生根率有较大差异，如“澳洲红”可达90%，而“美22”只有60%。

（5）瓶外适应性培养将生根组培苗，开瓶炼苗3～5天后，移植到大棚温室沙畦中培养，沙为风沙或细河沙加少量细土为宜，控制好温、湿度，在苗长有3～5片叶时，可移植到土中培养。50天后可到树莓生产园中定植，也可定植在苗圃地做繁苗母株。