常用器械的准备

第一节　常用器械的准备

兽医微生物检验所用的器械种类甚多（如吸管、试管、三角瓶、烧杯、培养皿、培养瓶、毛细吸管、玻片、盖玻片、橡皮塞、橡胶管、刀、剪、镊等），在选购时注意各种规格和质量，一般应能耐受多次高热灭菌。这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。有的还要进行包装，经过灭菌等准备后，才能使用。现将常用器械的准备和灭菌列述如下。

一、玻璃器皿的准备

（一）新购的玻璃器皿

新购玻璃器皿常附有游离碱质，不可直接使用，应先除去包装沾染的污垢后，用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于1%～2%的工业盐酸中数小时，除去游离的碱性物质，再以流水冲净。对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入少许浓盐酸，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。

（二）用过的玻璃器皿

凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，除去污垢，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。若用皂液未能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。洗液的主要成分是重铬酸钾和浓流酸，其作用是将有机物氧化成可溶性物质，以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用，使用时应特别小心，避免溅到衣服、身体和其他物品上。

1.平皿、试管、烧杯、三角瓶、注射器、组织培养瓶等：可用高压灭菌器灭菌（0.105MPa即121℃20～30min）。

2.吸管、载玻片、盖玻片等：可浸泡于5%石炭酸、2%～3%来苏儿或0.1%升汞中48h。浸泡吸管的玻璃筒底部应垫以棉花，以防投入吸管时管尖破裂。玻片和滴管也可用2%～5%碳酸钠煮沸消毒5～10min，后用清水冲洗干净，拭干，保存或浸泡于95%酒精中备用。

3.盛有固体培养基（如琼脂）或沾有油脂（如液体石蜡或凡士林等）的玻璃器皿：应于消毒后，趁热将内容物倒净，用温水冲洗，再以5%肥皂水或其他洗涤剂溶液煮沸5min，然后以清水冲洗。

（三）云雾状玻璃器皿的处理

凡玻璃器皿上有云雾状而不能用普通方法洗净者，可用清洁液处理。

1.清洁液的配制法：取重铬酸钾10g溶于常温清水63ml中，配成重铬酸钾饱和溶液，再吸取此液35ml加入粗质浓硫酸1000ml中即成。

2.处理：将有云雾状的玻璃器皿浸泡于清洁液中24h，然后取出用清水冲洗。若仍洗不净者弃之。清洁液可重复应用多次，直至其颜色变为蓝绿色或黑色为止。

（四）玻璃器皿的洗涤

欲洗去玻璃器皿上的油脂和污垢，其步骤如下。

1.一般玻璃器皿

（1）将处理过的玻璃器皿浸泡于水中，用毛刷或试管刷蘸上洗涤剂或肥皂，刷去油脂和污垢，然后用自来水或清水冲洗数次，最后用蒸馏水冲洗。

（2）经清水冲洗后，如发现玻璃器皿上尚有油迹时，可置于2%～5%碳酸钠溶液或5%肥皂水中煮沸30min，再用毛刷刷去油脂和污垢，最后用清水或蒸馏水冲洗干净。

2.吸管　吸管不易洗涤，需要小心，绝不能粗鲁急躁，其洗涤步骤如下。

（1）将吸管从消毒剂中取出后，先用细铁丝取出管口的棉塞，若棉塞太紧不易取出时，可将铁丝尖端压扁，插入棉塞与管壁之间。轻轻一转即可将棉塞拉出。

（2）将吸管浸泡于5%热肥皂水中，用少许纱布或棉花缠于细铁丝尖端上，以刷洗管内的油脂和污垢。铁丝尖端的纱布或棉花应随时更换。

（3）用洗洁球一吸一挤反复冲洗数次，然后用清水和蒸馏水反复冲洗数次，倒立于垫有纱布的金属丝篓或干净的搪瓷盆中干燥。

（五）玻璃器皿的干燥

洗净的玻璃器皿通常倒插于干燥架上，令其自然干燥，必要时可放于温箱或50℃左右干燥箱中，以加速其干燥，但温度不宜太高，以免玻璃器皿破裂。干燥后以干净的纱布或毛巾拭去水迹。

（六）玻璃器皿的包装

1.棉塞的制作：依试管口和瓶口的大小，取适量棉花卷成圆锥形棉塞，或用纱布包裹棉花制成棉塞。如直接用棉花做棉塞时，要选择纤维长的新棉花，不能用脱脂棉，制作时将棉花分成数层，互相重叠，折叠卷紧，制成长4～5cm的圆锥形棉塞。如用纱布包裹棉塞时，也可选用脱脂棉，制作时将纱布放于试管口和瓶口上，用适量棉花塞入纱布中，制成长4～5cm的圆锥形棉塞，然后用纱布包好，用线绳扎紧即可。

2.试管的包装：将试管口塞上棉塞，以8～10支为一捆，用棉线在试管的中部捆扎，再用一张牛皮纸或报纸将整捆试管的棉塞端包好，纸外捆以棉线即成。

3.吸管的包装：先用细铁丝或长针头在吸管口端塞入少许棉花（塞入的棉花应大小适宜，太小则松，吹吸时随气流上下移动而失去作用；太大则紧，阻塞气流而吹吸不便）然后用报纸条从尖端开始斜向卷曲缠绕包裹，口端多余的纸筒折向前，再以10支为一捆，用报纸或牛皮纸包起，外捆以棉线，置于铝制消毒筒内消毒。

4.平皿的包装：相同大小的平皿，以4～6个为一捆，底朝上盖朝下叠成圆柱状，然后用报纸或牛皮卷包裹。

5.组织培养瓶和青霉素瓶的包装：单个或数个一包，用报纸或牛皮纸包裹，外捆以棉线即可。

6.锥形瓶和烧杯的包装：锥形瓶塞上棉塞后，用报纸逐个包扎或不用纸包扎。烧杯或锥形瓶可直接用报纸逐个包扎。

7.注射器的包装：将注射器分开，用纱布包裹，然后用报纸或牛皮纸包裹。

（七）玻璃器皿的消毒

包扎好的玻璃器皿用前进行干热灭菌（160℃～180℃，1～2h）或高压灭菌（0.105M Pa即121℃20～30min）。

二、细胞培养用玻璃器皿的准备

（一）清冼　无论新购买的或用过的玻璃器皿，都必须浸泡于粗硫酸或清洁液中过夜，次日取出用自来水浸泡4～6h后，用自来水冲冼10次以上或用流水冲冼5min以上，最后用蒸馏水或双蒸馏水冲洗6次或3次，在温箱中干燥后即可包装。

（二）包装　包装方法基本同一般玻璃器皿。细胞培养瓶可用软木塞塞上，外包以牛皮纸；青霉素瓶可直接放入消毒盒内消毒。

（三）消毒　包装好的玻璃器皿，均以干热灭菌（160℃，1～2h）。消毒过的器皿，必须在1周内用完，过期应重新消毒。

三、橡胶制品的准备

橡胶制品如橡皮塞、胶头滴管、洗洁球、橡胶管等一般经肥皂水煮沸20min后，流水冲洗10次，再以蒸馏水冲洗2次后，用双蒸馏水浸泡于玻璃缸中备用。使用前煮沸消毒15min，也可取出晾干包装高压灭菌消毒后使用。

四、金属用具的准备

刀、剪、镊子等金属用具使用后，应用肥皂、清水洗净擦干，防止生锈。刀、剪、镊子等金属用具使用前浸在95%酒精内，用时取出经过火焰，待器械上酒精自行燃烧完毕即可使用（注意：防止烧伤手或燃烧盛有酒精的玻璃缸）。器械上如有动物组织碎屑，应先在5%石炭酸中洗去碎屑，然后蘸酒精燃烧灭菌。