异常毒性检查

第四节　异常毒性检查

一、概念

异常毒性检查系指药品项下规定的剂量，注入小鼠体内，出现中毒或死亡的情况，以检查药品安全性的一种方法。

二、技术依据及原理

将一定量的供试品溶液注入小鼠体内或口服给药，在规定时间内观察小鼠死亡情况，以判定供试品溶液是否符合规定。

三、注意事项

供使用的小鼠应健康合格，在试验前及试验的观察期内，均应按正常饲料条件饲养。做过本试验的小鼠不得重复使用。

四、材料、仪器、试剂的准备及基本要求

1.天平

（1）精度0.01mg或0.1mg，供试品称量用。

（2）精度0.1mg或1mg，试剂称量用。

（3）精度0.1g，小鼠称重用。

2.试验用具

小鼠固定装置（包括小鼠固定器、支架）、注射器（1ml以下，精度0.01ml）、大称量瓶、吸管、移液管、小烧杯。

3.试剂

75％乙醇、注射用水、氯化钠注射液或其他规定的溶剂。

4.供试品溶液

（1）原料药。精密称取适量，置适宜容器中。按规定浓度，加精密量取的一定量溶剂，搅拌使溶解。

（2）注射液。用75％乙醇棉球消毒安瓿颈部或瓶塞。精密量取一定量药液。按规定浓度，加精密量取的一定量溶剂，混匀。

（3）粉针剂。用75％乙醇棉球消毒安瓿颈部或小瓶瓶塞，加入一定量规定的溶媒配成所需浓度。

（4）试验动物。健康无伤、体重17～20g的小鼠。

五、试验步骤

除另有规定外，取5只小鼠，按各药品项下规定的给药途径，每只小鼠分别给予供试品0.5ml，给药途径有以下几种。

1.静脉注射

（1）将小鼠放入固定器中，使尾巴暴露在外。

（2）用75％乙醇擦拭鼠尾注射部位。

（3）尾静脉注入供试品溶液，注射速度一般为4～5s，如注射部位皮下发白且推入药液有阻力时，表示针头未插入静脉内，应重插，如药液有损失，应另取小鼠注射。

（4）注射完毕后，拔出针头，在注射部位止血后取出小鼠，放入鼠盒中，观察即时反应。

（5）共注射5只小鼠，正常饲养。

2.腹腔注射

（1）一手捏小鼠，用拇指和食指捏住小鼠颈背部，用无名指及小指固定其尾及后肢，腹部向上。

（2）用75％乙醇擦拭小鼠腹部（或背部）注射部位。

（3）腹腔注入供试品溶液。

（4）注射完毕，拔出针头，放入鼠盒中，观察即时反应。

（5）共注射5只小鼠，正常饲养。

3.皮下注射

（1）握小鼠，同腹腔注射法。

（2）用75％乙醇擦拭小鼠腹部（或背部）注射部位。

（3）皮下注入供试品溶液，可见注射部位皮下出现泡疱状隆起。

（4）注射完毕，拔出针头，放入鼠盒中，观察即时反应。

（5）共注射5只小鼠，正常饲养。

4.口服给药

（1）握小鼠，同腹腔注射法。

（2）注射器按胃管灌注针头，缓缓插入小鼠口腔，使其顺利进入食道，立即注入供试品溶液。

（3）给药完毕，拔出针头，放入鼠盒中，观察即时反应。

（4）共灌胃5只小鼠，正常饲养。

六、记录

记录包括以下内容：

　　　试验日期　　动物　　　　来源　　　　性别　　体重

　　　溶液配置　　给药途径　　给药计剂　　结果

七、结果判定

除另有规定外，5只小鼠在给药后48h内不得死亡。

如有死亡，应取体重18～19g的小鼠10只复试，全部小鼠在48h内不得有死亡。