注射液中不溶性微粒检查

第五节　注射液中不溶性微粒检查

一、概念

用光电法或显微计数法，检查溶液型静脉注射剂中不溶性微粒的大小及数量的方法。

二、技术依据及原理

将25ml注射液过滤，使所含外来不溶性微粒截留在微孔膜上，在100倍显微镜下，用经标定的目镜测微尺分别计算其最长直径大于25μm的微粒，根据过滤面积上的微粒总数除以25，计算出被检测的注射液每1ml中含不溶性微粒的数量。

三、注意事项

各种形状的微粒应以实测到的最长直径计算，重叠微粒和聚合胶体微粒均以单个微粒计算；结晶析出不属于检测范围，故不应计算。

必要时可另取净化水25ml依法操作一式两份。此项空白试验仅可视作对操作环境的认证，所得数据不必在供试品检查结果中扣除，但对检查结果的正确与否有密切关系。此项试验必须检测全滤膜，得到可信赖的数据后方可进行样品检测；如试验结果25ml中含25μm以上微粒数如超过5粒，则说明操作环境不佳，应设法改善。

四、材料、仪器的准备及基本要求

1.试验环境

试验操作所处环境应不得导入明显的微粒，可以在超净室、层流净化室或能符合要求的洁净实验室中进行。玻璃仪器和其他所需的用品都应洁净、无微粒。本检查法中所用净化水应使用不大于1.2μm的微孔滤膜滤过。

2.器材

（1）显微镜。

（2）目镜测微尺和镜台测微尺（用于目镜测微尺的标定）。

（3）显微镜照明灯。

（4）微孔滤膜孔径0.45μm，直径25mm，具有格栅。

（5）直径25mm夹式定量滤器。

（6）陪氏载片。

（7）平头无齿镊子。

（8）计数码器。

五、检验步骤

1.检查前的准备

（1）取本试验中所有的净化水100ml，用本法测定，整张膜面上，含10μm以上的不溶性微粒应在10粒以下。临用新制。

（2）用水冲洗陪氏载片，再用净化水冲洗，沥干，置试验环境中备用。

（3）取微孔滤膜用净化水浸润，用平头无齿镊子将微孔滤膜夹住，漂洗几次，以净化水反复冲洗，移至陪氏载片上，微启盖子待干燥后合盖，在100倍显微镜下观察整张滤膜，不得有25μm以上的微粒，大于10μm的微粒应在5粒以下，符合上述要求的滤膜可供测定用。

（4）将符合要求的滤膜置滤器托架上，用滤膜夹固定滤器，倒置，反复用净化水冲洗滤器内壁，沥干后安装在抽滤瓶上备用。

（5）在层流净化台上，将滤器用净化水冲洗至洁净，用平头无齿镊子夹取微孔滤膜。

（6）事先除去的待检样品瓶盖，并用水将容器外壁洗净，置适宜试验环境中备用。

2.检查法

取供试品，在层流净化台上翻转20次使溶液混匀，立即小心开启容器，先倒出供试液少量冲洗开启口，再量取供试液25ml，置上述滤器中；静置1min，缓缓抽滤至滤膜近干，用净化水25ml沿滤器内壁洗涤并抽滤至滤膜近干。取陪氏载片，涂抹极薄一层甘油，用平头无齿镊子将上述抽滤近干的滤膜移置陪氏载片上，平整滤膜并使滤膜格栅的垂直线与陪氏载片垂直线基本重叠，微启盖子使滤膜干燥，待干燥后将盖子闭合；另将显微镜按规定组合100倍的物、目镜，将盖子闭合的陪氏载片置显微镜镜台上，用移动尺夹子将载片固定，调好入射光（保持灯光的入射角10～20°），调节显微镜使滤膜格栅清晰可见。调节好显微镜后，边缘清晰可见，具有立体感的微粒方可计数。

六、记录与计算

1.记录

记录应包括所有仪器；样品包装情况，送检数量与代表整体数量；格栅滤膜处理前后微粒水平，净化水来源或制备情况与含微粒水平。

2.计算

用手揿3计数码器，分别统计全滤膜上最长直径大于10μm的微粒数，以及大于25μm微粒数；分别除以25，即得每1ml供试液中两种类别的微粒个数。

七、结果判定

除另有规定以外，每1ml供试液中含10μm以上微粒数未超过20粒，且其中含25μm以上的微粒数未超过2，判为符合规定。

如每1ml供试液中含10μm以上微粒数超过20粒；或虽未超过20粒，但其中含25μm以上的微粒数超过2粒，均判为不符合规定。