免疫抗体阳性怎么治疗

第一节　酶联免疫吸附试验

一、酶联免疫吸附试验的应用

酶联免疫吸附试验（ELISA）因其特异性高，敏感性也好，受到国内、外许多学者的认可。细胞免疫随病情加重而减弱，体液免疫随病情加重而增强。结核分枝杆菌是典型的胞内寄生菌，尤其是在巨噬细胞内。有研究认为：对结核菌的免疫，首先是细胞免疫，其次才是体液免疫，二者是分离的。所以，反映细胞免疫强弱的迟发性变态反应，不能检出所有的结核病牛，仅以此法检测牛结核病显然是不准确的。

有研究认为，结核病牛血清抗体IgG与正常水平差异显著，从理论上阐明了通过检测血清中抗体以诊断疾病的可能性。结核菌的IgG抗体的血清水平与病变程度呈正相关，因此，检测血清中IgG抗体的水平对于疾病的诊断有重要意义。细胞免疫是主要的免疫方式，PPD是检测细胞免疫，血清学方法是检测体液免疫，所以，PPD的检出率要高于血清学方法。但是，PPD阳性不能全部包括所有抗体阳性，且PPD阳性牛也未必有临床表现。而抗体阳性往往意味着病情正在恶化，正是危险的传染源，所以，从这方面来看，血清学方法比PPD检测更重要。另外，非典型分枝杆菌感染及某些寄生虫病等非特异性因素的干扰，均可引起牛的迟发性变态反应阳性，而体液免疫的水平却很低，这样就使得血清学方法更容易排除假阳性。但牛分支杆菌与其他许多分支杆菌具有类属的抗原性，因此，常出现假阳性反应而干扰牛结核抗体的检测。一些研究人员以鸟分支杆菌作为吸收抗原处理待检血清，吸收其中的非特异性类属抗体，提高了牛结核ELISA的特异性。

还有用ELISA方法对牛结核病血清抗体检测的最佳条件（包括抗原的种类、浓度、纯度、血清稀释度、是否包板等）进行研究探讨，认为ELISA方法是对目前常用的PPD方法的一个补充，因为，ELISA方法可对大型养殖场进行结核病的初筛省去大量的时间和财力、物力的耗费。有人发现，传统PPD皮内变态反应存在非特异性的干扰，易出现假阳性，用ELISA方法可排除非典型分枝杆菌造成的非特异性干扰；将ELISA方法同传统的PPD方法进行比较，发现二者有一定的差异，即PPD阳性牛、可疑牛用ELISA方法检测未必是阳性，且ELISA方法有较好的特异性；1972年，Eagrall等发现了机体对结核分枝杆菌的免疫机理，认为机体先是有细胞免疫，其次是体液免疫，二者是分离的。细胞免疫随机体抵抗力的增强而增强，体液免疫随机体抵抗力的减弱而增强； PPD是检测细胞免疫，ELISA是检测体液免疫，所以，PPD的检出率高于ELISA的检出率，但PPD不能包全所有ELISA阳性牛，且PPD阳性牛临床也未必有表现，而ELISA阳性则意味着病情正在恶化，正是危险的传染源。所以，ELISA方法从这一点上说比PPD要重要。另外，用SPA-ELISA及BA-Dot-ELISA对牛乳清抗体进行检测，因结核病可通过乳制品传染给人和其他动物，因此，测定奶制品是否存在结核病感染，是一个值得研究的方法。

有研究者用BA-Dot-ELISA方法对牛血清抗体进行检测，比较方便、快速。

目前，有学者认为牛结核病检测应将PPD方法同ELISA方法结合起来有助于牛结核病检疫，排除非特异性干扰。下面介绍一下原理及方法。

二、ELISA的原理及方法

1.基本原理

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。

2.间接ELISA

（1）材料

①包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液。

②包被抗原、酶标抗体、阴性及阳性对照血清，待检血清。

③ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。

（2）方法步骤

①加抗原包被→4℃过夜，洗涤3次，抛干。

②加待检血清→37℃2小时，洗涤3次，抛干。

③加酶标抗体→37℃2小时，洗涤3次，抛干。

④加底物液→37℃30分钟，加终止液。

⑤用ELISA检测仪测定OD值，并判定结果。