第三节 细菌的人工培养
用人工方法，提供细菌生长繁殖所需要的各种条件来培养细菌，以达到对细菌进行鉴定和进一步利用的目的。因此，细菌的人工培养技术是微生物学研究和应用的重要手段。
一、培养基的类型
培养基是把细菌生长繁殖所需要的多种营养成分合理地配合在一起所制成的营养基质，用于细菌的分离、纯化、鉴定、保存等。根据培养基的物理状态、用途等可将其分为多种类型。
（一）根据培养基的物理状态分类
1.液体培养基：将细菌生长繁殖所需的多种营养物质直接溶解于水，不加凝固剂制成的培养基，即为液体培养基。常用于生产和实验室中细菌的扩增培养以及确定细菌生长曲线等。实际操作中，在使用液体培养基培养细菌时进行振荡或搅拌，增加培养基中的通气量，并使营养物质更加均匀，可大大提高培养效率。
2.固体培养基：在液体培养基中加入1.5％～2％的琼脂，使培养基凝固呈固体状态。固体培养基可根据需要制成平板培养基、斜面培养基和高层培养基等。平板培养基常用于细菌的分离、菌落特征观察、药敏试验以及活菌计数等；斜面培养基常用于菌种保存；高层培养基多用于细菌的某些生化试验。
3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.3％～0.5％的琼脂，凝固后培养基呈半固体状态。多用于细菌运动力的观察，也可用于保存菌种。
（二）根据培养基的用途分类
1.基础培养基：基础培养基含有细菌生长繁殖所需要的最基本的营养成分，可满足大多数细菌生长繁殖需要。常用的是肉汤培养基、普通营养琼脂培养基及蛋白胨水等。
2.营养培养基：在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水、酵母浸膏及生长因子等，用于培养营养要求较高的细菌。常用的营养培养基有鲜血琼脂培养基、血清琼脂培养基等。
3.鉴别培养基：利用不同细菌分解糖、蛋白质的能力及其代谢产物不同，在培养基中加入某种特殊营养成分和指示剂，以便观察细菌生长后发生的变化，从而鉴别细菌。如伊红美蓝培养基、麦康凯培养基、三糖铁琼脂培养基等。
4.选择培养基：在培养基中加入某些化学物质，以利于目的菌的生长，抑制杂菌的生长，用来将某种或某类细菌从混杂的细菌群体中分离出来，如分离沙门菌、志贺菌等常用的SS琼脂培养基。
5.厌氧培养基：专性厌氧菌不能在有氧环境中生长，将培养基与空气及氧隔绝或降低培养基中的氧化还原电势，可供厌氧菌生长。如肝片肉汤培养基、庖肉培养基，应用时于液体表面加盖液体石蜡以隔绝空气。
二、细菌在培养基中的生长情况
细菌在培养基中的生长情况是由细菌的生物学特性决定的，了解细菌的生长状况有助于识别和鉴定细菌。
细菌在液体培养基中生长后，常呈现浑浊、沉淀或形成菌膜等情况。
细菌在固体培养基上形成菌落。在一般情况下，一个菌落是一个细菌繁殖的后代，因而平板培养基可用来分离细菌。不同细菌菌落的大小、形态、色泽、透明度、隆起度、硬度、湿润度、表面性状、边缘结构等方面均有各自的特征。常通过固体培养基上的菌落，进行细菌的纯化、传代及鉴定等。
用穿刺接种法将细菌接种到半固体培养基中，具有鞭毛的细菌，可以向穿刺线以外扩散生长，无鞭毛的细菌只沿着穿刺线生长。用这种方法可以鉴别细菌有无运动力。
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