项目一 菌种生产的设备条件
掌握菌种厂的筹建原则及最优规划设计后,可以根据生产规模,购买必需的菌种生产设备,保证菌种生产原料配料适宜,灭菌彻底,创造无菌接种及适宜的培养条件。了解食用菌生产的设施设备条件,有助于测算投资,节约成本,提高设备利用率和生产效率等。
一、配料设备
1.原料处理设备
(1)切片设备:包括切片机(将木材切成小木片)、粉碎机、过筛机(筛出木屑中的块状木等杂物)。根据栽培品种的不同,切片或粉碎后形成粒径不同的木屑。如图5-1所示。
(2)铡草机:可将栽培食用菌的麦秸、稻草及其他菌草铡成3~5cm的草段。如图5-2所示。
图5-1 切片设备
图5-2 铡草机
(3)搅拌机:将各原料及水分混合、搅拌均匀,如图5-3所示。
2.装料设备
装瓶机将原料装于菌种瓶,装袋机将培养料装入塑料膜制的菌种袋,现已有装瓶装袋两用机械。装瓶机、装袋机分别如图5-4、图5-5所示。
装袋机每台每小时装800袋,需以7人为一组,其中添料1人,套袋装料1人,传袋1人,捆扎袋口4人。
菌种袋、领圈、玻璃菌种瓶分别如图5-6、图5-7、图5-8所示。
不论采用机械或人工装料,都要紧实无空隙,光滑均匀,特别是料与膜之间不能留有空隙,否则袋壁之间易形成原基,消耗养分。
图5-3 拌料机
图5-4 装瓶机
图5-5 装袋机
图5-6 菌种袋
图5-7 颈圈
图5-8 玻璃菌种瓶
二、灭菌设备
1.高压蒸汽灭菌锅(高压锅)
将待灭菌物置于密封的高压锅内,可以利用加压高温蒸汽在较短的时间内达到彻底灭菌的目的。常用的高压锅类型如图5-9、图5-10、图5-11所示。
图5-9 手提式高压锅
图5-10 立式高压锅
图5-11 卧式高压锅
图5-12 常压灭菌锅示意图
一般液体培养基在0.1MPa的压力下处理20~30min,温度约121℃。对固体培养基,如木屑、棉子壳、谷粒、粪草等,必须在0.15MPa的压力下处理1~2h,温度约128℃,才能达到满意的效果。
使用高压锅的步骤如下:加水至水位线,装锅,加盖,加热升温;当压力升至0.05MPa时,打开排气阀排除锅内冷空气,压力降至0;当排气阀有大量热蒸汽冲出时,关闭排气阀继续升温;当压力升至规定指标,温度达到规定指标时,开始调至稳压;到规定时间后,关闭电源、降压、开盖、取物。
2.常压蒸汽灭菌锅(常压灭菌锅)
常压蒸汽灭菌是将待灭菌物置于常压灭菌锅内,以自然压力的蒸汽进行灭菌的方法。常压灭菌锅(灶)的建造方法根据各地习惯而异,如图5-12、图5-13所示。
常压蒸汽灭菌的时间通常以大量冒汽(沸腾,100℃)开始计算,一般维持8~10h。灭菌时注意不要将待灭菌物排得过密,以保证灭菌锅内的蒸汽流通。开始时以旺火猛攻,使灭菌锅(灶)内的温度尽快上升至100℃,中途不能停火,经常补充热水以防蒸干。此法的优点是建锅(灶)成本低、容量大,缺点是灭菌时间长、能源消耗大。
三、接种设备
接种设备指用于分离和扩大培养各级菌种的专用设备和工具,主要包括接种室、接种箱、超净工作台、酒精灯,以及接种针、镊子、接种枪等各种接种工具。
1.接种室
接种室又称无菌室,是分离和移接菌种的小房间,实际上是扩大的接种箱。接种室在构造和设置上的要求如下。
(1)接种室应分里、外两间:里间为接种间,面积为5~6m2;外间为缓冲间,面积为2~3m2。两间门不宜对开,出入口要求装上推拉门,高度均为2~2.5m。接种室不宜过大,否则不易保持无菌状态。
图5-13 常压灭菌锅实物图
(2)房间里的地板、墙壁、天花板要平整、光滑,以便擦洗消毒。
(3)门窗要紧密,关闭后与外界空气隔绝。
(4)房间最好设有工作台,以便放置酒精灯、常用接种工具。
(5)工作台上方和缓冲间天花板上安装能任意升降的紫外线杀菌灯和日光灯。
接种室的使用规程如下。
(1)在每次使用前半小时,把所需要的器材搬入缓冲室,在接种室和缓冲室用5%石炭酸溶液喷雾后,开启紫外线灯照射半小时。
(2)进入缓冲室,穿上无菌工作服、鞋,戴好口罩、工作帽,然后用2%煤酚皂液将手浸洗2min。
(3)将所需物品移入接种室,按一定位置摆好,检查是否齐全,并用5%石炭酸溶液在工作台的上方和附近的地面上喷雾,然后退回缓冲室,待几分钟后再进入接种室工作。
(4)接种前,用70%酒精棉球擦手,然后按常规在火焰上进行各项操作。操作时动作要轻捷,尽量减少空气流动,两人操作时要配合默契。用后的火柴梗、废纸不要扔在地上,应放在专用的瓷盆里。
(5)工作结束,及时取出接种材料,然后清理台面,将废物拿出室外,再用5%石炭酸溶液全面喷洒,或打开紫外线灯照射半小时。
(6)接种时如遇棉塞着火,用手紧握即可熄灭,或用湿布扑灭,切勿用嘴吹,以免扩大火焰。如遇培养物或有菌容器打碎散落,应及时用揩布沾上5%石炭酸溶液,收拾擦拭,再用酒精棉球擦手后才可继续操作。
2.接种箱
接种箱是分离、移接菌种的专用木箱。它要求密闭严实,操作方便,易于消毒,以便进行无菌操作。接种箱实际上就是一个缩小的接种室。在有条件的情况下,接种箱内装上一支日光灯用于照明,装上一支紫外线灭菌灯用于消毒。
接种箱(见图5-14)有各种形状和规格,只要操作方便,能达到无菌状态即可。接种箱一般高约60 cm,宽约150cm,长约50cm,木质结构,分为单人操作接种箱、双人操作接种箱和多人操作接种箱。双人操作接种箱四个侧面均装玻璃,单人操作接种箱三个侧面装玻璃。接种箱要求关闭严密、无缝,便于密闭熏蒸消毒,进行无菌操作。接种箱的正面开两个圆洞(双人操作接种箱的正、反面均开两个圆洞),洞口上装上布袖套,双手由此伸入操作。圆洞外设有推门,不操作时关闭,保持接种箱内清洁。箱内一般放置接种用的酒精灯、点燃物和常用接种工具(如接种针、接种匙等)。菌种和被接瓶、袋接种前才放入。由于接种箱的空间小、箱内空气容量少、接种时间长,火焰容易熄灭,因此,可在箱顶两侧开一个直径为10cm左右的圆孔,并用数层纱布覆盖,以利于内外空气交换。
接种箱的使用规程如下:
(1)每次接种前用5%石炭酸溶液在接种箱内壁和空间喷雾。
(2)用肥皂洗手后搬进接种物品,关闭箱门,开启紫外线灯照射20~30min。
(3)用70%酒精棉球擦手,然后伸进接种箱内操作。
图5-14 接种箱
(4)操作完毕要及时清扫掉落在箱内的培养物和火柴梗、棉球等杂物,并用2%来苏儿擦拭,再用5%石炭酸溶液全面喷雾后关闭。
3.超净工作台
超净工作台(见图5-15)是一种供单人或双人操作的通用型局部净化设备,可造就局部高清洁度空气环境,是科研制药、医疗卫生、电子光学仪器等行业理想的专用设备。超净工作台使用时必须放在比较洁净的房间,一般放于接种室中。超净工作台的优点是操作方便自如,比较舒适,工作效率高,预备时间短,开机10min以上即可操作,基本上可随时使用。在工厂化生产中,接种工作量很大,需要经常、长久地工作时,超净工作台是很理想的设备。但在菇农家庭规模栽培时,因为价格昂贵,一般不必买超净工作台。
图5-15 超净工作台
4.酒精灯
在菌种分离、移接、接种时,一般必须在酒精灯周围进行。当酒精灯点燃时,其火焰附近10cm范围内会形成一个无菌区。因此为了保证分离、接种的效果,防止杂菌污染,一般应同时点燃两个酒精灯,扩大无菌区,并在其周围进行接种。
5.接种工具
接种工具(见图5-16)主要有接种针、接种铲、接种匙、接种枪、打孔器,以及大镊子等。
四、培养设备
(1)菌种培养室:用来放置接种后的各级菌种,并能为菌种的生长提供较好的生活条件,如能保温、调湿、避光、通风等。房间的大小和数量可根据生产规模而定。
(2)恒温培养箱:用于斜面试管菌种的培养,大型培养箱有时也用于原种的培养。它的温度一般在5~60℃范围内可以任意调节。培养箱的作用与培养室相同,实际上只是体积小些,设备更加完善而已。
图5-16 接种工具
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