实训项目六 食用菌液体菌种培养
一、目的要求
了解液体菌种的特性及重要作用，掌握平菇液体菌种的培养方法及应用。
二、实训原理
配制液体培养基，培养平菇液体菌丝体，生长快而旺盛，培养周期短（5～7天），便于工厂化生产控制，不受季节限制，可以大批量生产。平菇液体菌种萌发快，可用于栽培种栽培平菇。
三、实训器材
（1）材料：液体培养基。
（2）菌种：平菇试管母种。
（3）仪器及用具：振荡培养箱或摇床、接种箱、高压灭菌锅、发酵罐（种子罐）、酒精灯、酒精棉球、玻璃球、接种铲、接种枪、恒温箱等。
四、实训内容
（一）摇瓶液体菌种生产
1.液体培养基的配方
土豆100g、玉米粉或麸皮20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、维生素B110mg、水1000 mL。
2.主要配制步骤
称量→煮溶→过滤→分装→灭菌。
3.接种
将平菇试管母种接于液体培养基中，每100mL培养基接种3～4块母种，无菌操作。
4.培养
（1）静置培养：将接种后的液体培养瓶静置于恒温箱中48h，温度25℃。
（2）振荡培养：待气生菌丝延伸到培养液中时，置于振荡培养箱或摇床里进行振荡，培养3～5天，菌丝球数目增多均匀分布于液体中即可。平菇培养液呈淡棕色，并有清香味。
摇床是液体菌种生产常用的设备。因为食用菌为需氧菌，液体菌种培养需要增加氧气的供应，因此，不断振荡有利于菌丝体的快速生长。
（二）一、二级液体菌种扩大培养
利用液体种子罐或发酵罐进行一、二级液体菌种扩大培养。一级种子罐通常为50～100L，二级种子罐为500～1000L。
液体菌种制作的主要工艺如下：
斜面菌种制备→摇瓶种子制备→种子罐或发酵罐菌种扩大培养。
液体种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度的菌丝体。
1.斜面菌种制备
制备方法（培养基配方和操作步骤）同试管斜面母种的制备，在此不再多述。
2.摇瓶种子制备
主要操作步骤如下：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→接种→振荡培养管理。
3.一、二级液体菌种扩大培养
主要操作步骤如下：称量→煮制→分装→种子罐或发酵罐灭菌→无菌检验→接种→供氧搅拌培养管理。
通过感官指标鉴别、仪表指示，控制液体菌种制作的主要参数：①菌龄；②菌种纯度检验；③接种量；④温度；⑤通气量；⑥搅拌速度；⑦酸碱度；⑧罐压；⑨泡沫控制；⑩发酵终点。
五、思考题
食用菌液体菌种的培养有什么意义？应注意些什么？
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